Y187感受态细胞说明书

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来源：上海淳麦生物科技有限公司 2019年10月07日 15:48

Y187酵母感受态细胞基因型：

MATα, ura3-52, his3-200, ade 2-101, trp 1-901, leu 2-3, 112, gal4Δ, met–, gal80Δ, URA3 : : GAL1_UAS-GAL1_TATA-lacZ, MEL1

Y187酵母感受态细胞简要说明：
Y187菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母单杂，双杂实验用菌株，MATα型，可直接转化质粒或与MATa型酵母菌株（Y2HGold，AH109等）通过mating操作进行筛库试验。
Transformation marker为: trp1, leu2，报告基因为：lacZ, MEL1。
Y187 -GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：PGBKT7和PGADT7。
质粒PGBKT7的筛选标志为TRP1，用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；
Y187酵母感受态细胞操作说明：

取100 μl冰上融化的Y187感受态细胞，依次加入预冷的目的质粒2-5ug，Carrier DNA（95-100度5min,快速冰浴，重复一次）10 ul ，PEG/LiAc 500ul并吸打几次混匀，30度水浴30 分钟（15 min时翻转6-8次混匀）。
将管放42度水浴15min （7.5 min时翻转6-8次混匀）。

上海淳麦生物科技有限公司感受态细胞培养专家 4006815880

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