上海锦玟：二氧化碳培养箱在动物细胞培养中的应用

    动物细胞多数需要微碱性环境，pH约为7.2~7.4，以不超出6.8~7.6范围为宜。缓冲系统对于维持培养基的pH是至关重要的，动物培养基的pH是通过模拟血浆中天然存在的

    CO2/NaHCO3（实际是CO32-/HCO3-）系统来控制的。配置动物培养基时，会将NaHCO3作为等渗溶液的一部分添加到培养基。

     一方面，由于NaHCO3不稳定，易分解产CO2，CO2从培养液中游离到空气中，会使培养液pH升高；另一方面，细胞呼吸产生的CO2以及代谢产生的酸性代谢产物，又使pH降低。

       在培养开始的一段时间，细胞较少，呼吸产生的CO2较少，前者作用大于后者，培养液中pH可能会明显上升，这就需要培养箱中补充一定量的CO2来维持pH；而后期随着细胞数目增多，细胞产生CO2增加，后者作用便大于前者，此时，培养基中pH可能会明显降低，尽管大多动物细胞耐酸能力比耐碱能力略强一些，但如果超过警戒值，则需要更换培养基进行传代。

     培养液中一般加入酚红作为pH指示剂，所以此培养基中颜色变化是：樱桃红色→粉红色→黄色。如果使用培养基之前，先通入CO2，或在CO2培养箱内进行开放式培养，则培养基颜色变化是：樱桃红色→黄色。如果培养基变黄，则需要及时更换培养基。

    培养箱中CO2浓度应与培养液中NaHCO3浓度相平衡，如果培养箱中CO2浓度设定在5%，培养液中NaHCO3的加入量应为1.97 g/L；如果CO2浓度维持在10%，则NaHCO3的加入量应为3.95 g/L。

     动物细胞对pH变化比较敏感，但植物细胞就没那么娇弱了，培养过程中pH的变化幅度只要别太大，对它并不会造成明显损伤。