蒸发光散射检测器ELSD检测三金片中羟基积雪草苷成分含量

三金片（测试物质：羟基积雪草苷）

三金片

Sanjin Pi an

【处方】金樱根     菝葜

羊开口     金沙藤

积雪草

【制法】以上五味，加水煎煮二次，次2小时，第二次1小时，煎液滤过，滤液合并，浓缩至适量，喷雾干燥，加人辅料适量，混匀，制成颗粒，干燥，压制成1000片（小片）或 600片（大片），包糖衣或薄膜衣，即得。

【性状】本品为糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后显棕色 至黑褐色;味酸、涩、微苦。

【鉴别】（1)取本品15片(小片）或10片（大片），除去包衣，研细,加乙醇15ml,超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加0. 01mol/L氢氧化钠溶液20ml,微热使溶解，用乙mi10ml振摇提取，弃去乙mi液,水溶液备用，乙酸乙酯10ml振摇提取，水溶液备用；乙酸乙酯液浓缩至1ml，作为供试品溶液。 另取金櫻根对照药材2. 5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氣甲烷-甲醇(17 : 3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色 淸晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显两个或两个以上相同颜色的主斑点。

（2）取〔鉴别〕（1)项下的备用水溶液，用水饱和的正丁醇15ml振摇提取，分取正丁醇液，用正丁醇饱和的水5ml洗涤， 弃去水洗液,正丁醇液蒸干，残淹加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取积雪草苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验， 吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以三氯甲烷-甲醇-水（7 : 3 ：0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%疏酸乙醇溶液，加热至斑点显色淸晰。供试品 色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

（3）取本品10片（小片）或6片（大片），除去包衣，研细，加乙酵50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液加盐酸5ml，加热 回流2小时，放冷，用40%氢氧化钠溶液调至中性，蒸至无醇味，残渣用热水40ml溶解，用二氯甲烷振摇提取2次(40ml， 30ml)，合并二氯甲烷提取液，蒸干，残渣加甲酵1ml使溶解，作为供试品溶液。另取菝葜对照药材5g，同法制成对照药材溶液。再取薯蓣皂苷元对照品，加甲酵制成每1ml含 0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则 0502)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（4 ：1）为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以10%硫酸乙醉溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯（365mn)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显两个或两个以上相同颜色的荧光斑点;在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

（4）取本品15片（小片）或10片（大片），研细，加甲醉 100ml,超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至约10ml,加在中 性氧化铝柱（100〜200目，5g,内径为1cm)上，用甲醇50ml 洗脱,收集流出液与洗脱液，蒸干，残渣用水20ml溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次15ml,合并乙酸乙酯提取液，蒸干，残渣加甲醉lml使溶解，作为供试品溶液。另取羊开口对照药材5g，加水100ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇20ml,同法制成对

照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5〜10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氣甲烷-丙酮-水(6 : 14 : 1)为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯（365mn)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

【检査】应符合片剂项下有关的各项规定。

【含量测定】照液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲酵-水(48: 52)为流动相；蒸发光散射检测器检测(漂移管温度：70度，气体流速3l/min，气体压力：3.8bar)。理论板数按羟基积雪草苷峰计算应不低于2000。

sanotac ELSD9000 蒸发光散射检测器

对照品溶液的制备  分别取羟基积雪草苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液和每1lml含0.6mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备  取本品30片（小片）或20片（大片），除去包衣，精密称定，研细，取约1.5g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重董，超声处理（功率250W,频率40kHz) 45分钟，放冷，再称定重量，用甲醉补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，回收溶剂至干，残渣加水20ml使 溶解，用水饱和的正丁酵振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次15ml,取正丁醇液，减压回收溶剂至干，残淹用甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

测定法  分别精密吸取上述两种浓度的对照品溶液各 10μ1与供试品溶液5〜10μl,注人液相色谱仪，测定，用外标 两点法对数方程计算，即得。

本品每片含积雪苹以羟基积雪草苷(C₄₈H₇₈O₂₀）计，小片不得0. 22mg;大片不得少于0. 35mg。

【功能与主治】清热解毒，利湿通淋，益肾。用于下焦湿热所致的热淋、小便短赤、淋沥涩痛、尿急频数;急慢性肾盂肾炎、膀胱炎、尿路感染见上述证候者。

【用法与用量】口服。小片一次5片，大片一次3片，一 日3〜4次。

【规格】（1)薄膜衣小片每片重0. 18g(相当于饮片1g)

薄膜衣大片每片重0.29g(相当于饮片3.5g)

糖衣小片片心重0.17g(相当于饮片2. 1g)

糖衣大片片心重0.28g(相当于饮片3.5g)

【贮藏】密封。