贴壁细胞标准换液步骤
一、准备工作
1. 废液缸
2. 吸管
3. 新鲜培养基
4. 油性记号笔/普通签字笔
5. 实验记录本
二、实验步骤
1. 打开层流,打开层流间和超净台的紫外线灯,废液缸和吸管同时照射;
2. 把水浴锅调整到37℃ 并使其稳定;
3. 将新鲜培养基放置到水浴锅中,注意防止水面高于瓶肩,100ml液体保持10分钟,(200ml液体保持15分钟,500ml液体保持20分钟),间或摇动;
4. 着无菌服装,帽子,口罩和手套
5. 用75%乙醇消毒培养基瓶外壁,放置到超净台上;
6. 将细胞培养瓶取出,用75%乙醇棉球消毒瓶底;
7. 用吸管吸弃旧培养基,更换吸管,于非细胞培养面加入新鲜培养基;
8. 记录实验过程和细胞培养瓶号。
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