人ELISA试剂盒中zui为常用的标本是血浆或血清,有时由于特定的检测项目,也常用到尿液、唾液、粪便等标本。目前血浆血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。在收集处理和保存上要注意下面几点:
1.要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA试剂盒测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。
2.要注意样本的采集及血清分离中要尽量避免细菌污染,这是因为细菌的生长,所分泌的一些酶可能会对抗体抗原蛋白产生分解作用;有些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身就会对用相应酶作标记的方法测定产生非特异性干扰。
3.血清标本应该以无菌操作分离,可以在2~8℃下保存一周,样本的长时间保存,要在-70℃保存。如为有菌操作,则建议冰冻保存
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