近来的赵老师在操作小鼠elisa检测试剂盒实验的时分发现了一个问题,所以来电我公司的售后部分问道:加完显色液(购买)显色必定时刻后,再加停止液(2M H2SO4,自己)后,当即测验其吸光度值,等过几分钟再测验吸光度值,发现两次测得的吸光度值发作衰减。第2次均小于*次。而且,加停止液时,从*条加到第12条后,测验发现,吸光度值从1-12条逐级衰减。条件是这12条酶标板都是同一种产品,而且包被相同蛋白。
ELISA试剂盒通过我公司技能专员的剖析,本来ELISA吸光度值衰减能够这样奇妙应对。
其实详细的原因也很简单,有可能是显色液的质量不够好。一般情况下,停止反响后OD值的下降前期不是很明显。停止后,吸光度值是会跟着时刻衰减,所以一般是加完停止液后当即测,这样比较准。再次剖析12条显示逐级递减的原因看看是否是:
① 显色时刻调整,如果你现在的显色时刻是10MIN,那调整到30MIN,再加停止液,观察上述现象是否出现。
② 停止液中加入少量甘油看下怎么样。建议您运用RD品牌的ELISA试剂盒,显色时刻是30分钟,停止后要求在30分钟内检测,加入停止液后,在加入停止液后2到3分终内检测,这是OD值相对比较高。拟合值能达到四个9。
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