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如何正确解决ELISA试剂盒

来源:研域(上海)化学试剂有限公司   2018年09月21日 09:44  

ELISA试剂盒实验中常会遇到这些疑问:    
1. 温育条件纷歧致,恒温箱温育较水浴显色深,OD值高出0.1-0.15,均选用恒温箱。如用水浴水温应控制在37℃。    
2. 样品数量纷歧,加样时刻长短纷歧。当重复某一样品时,加样时刻尽可能与初度靠近。    
考虑到有些客户没有实验设备,我公司还可以供给代测效能,只需付试剂盒的费用,代测是免费的哦!
间接法 :此测定方法与直接法类似,纷歧样在于一级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。    
双抗体夹心法 :被检查的抗原包被在两个抗体之间,其间一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。
ELISA试剂盒另一个则是检查抗体,此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量;或不符号,再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。
这两种抗体有必要留心选择,才可防止交互反响或竞赛一样的抗原联络部位。        
竞赛法:样本里的抗原(悠闲抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一同竞赛一样的抗体,当样品里的悠闲抗原越多,就可以联络越多的抗体,而固定抗原就只能联络到较少的抗体,反之亦然。
经清洁进程,洗去悠闲抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只需固定抗原的对照组效果相比较,根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。
ELISA试剂盒直接法 :将抗原直接固定在固相载体上,参加酶符号的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。

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