① 仪器的杂散光大小。
② 仪器的光度噪声。
③ 仪器的基线平直度。
④ 仪器的光谱带宽。
⑤ 试样的来源, 包括样品的制备, 取样的方法。
⑥ 样品的制备, 包括称量、容量、溶剂、试剂、pH 值、时间、温度等。
⑦ 比色皿的性能等。
由此可知, 光度准确度或吸光度误差AA ( 或ΔA) 是一个综合性的技术指标。要使用紫外可见分光光度计测得准确可靠的数据, 必须注重上述几个方面的影响。否则, 不可能得到准确可靠的数据。特别应该指出的是, 在给出吸光度误差AA (或ΔA) , 同时也给出透射比误差TA ( 或ΔT) 时, 二者不能相互矛盾。
双光束紫外分光光度计的光度噪声直接影响仪器的信噪比,目前国内外厂商给出的整机光度噪声都是指仪器在500nm处光度噪声,主要是用于比较不同仪器的优劣,而基线平直度反应的是每个波长上的光度噪声。
它是用户关心的技术指标之一,同时也是主要分析误差的来源之一,它决定紫外可见分光光度计在各个波长下的分析检测浓度的下限。
影响基线平直度的因素很多,例如:滤光片或光学元件上有灰尘,会产生散射,从而引起基线平直度变坏;滤光片未安装好,用于不同波段不同的滤色片切换时会产生噪声,使基线平直度变坏;氘灯和钨灯切换时产生噪声;扫描速度太快也会引起平直度变坏等等。
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