类胡萝卜素( carotenoids)是一类重要的天然色素的总称, 普遍存在于动物、高等植物、真菌、藻类的黄色、橙红色或红色的色素之中。它是含40个碳的类异戊烯聚合物, 即四萜化合物。典型的类胡萝卜素是由8个异戊二烯单位首尾相连形成。类胡萝卜素的颜色因共轭双键的数目不同而变化。共轭双键的数目越多, 颜色越移向红色。迄今, 被发现的天然类胡萝卜素已达700多种, 根据化学结构的不同可以将其分为两类, 一类是胡萝卜素(只含碳氢两种元素, 不含氧元素,如B2胡萝卜素和番茄红素), 另一类是叶黄素(有羟基、酮基、羧基、甲氧基等含氧官能团, 如叶黄素和虾青素) 。
ɑ和ß胡萝卜素因其结构性质相似,分离是液相检测的一个难点。常规键合相如C18很难将这两种异构体实现基线分离。
本文采用赛默飞Acclaim C30色谱柱按照GB5009.83-2016方法对ɑ和ß胡萝卜素进行分离,分离度可达到2.4.
样品前处理
α-胡萝卜素:25ug/ml,甲醇-甲基叔丁基醚溶解,再用初始流动相1:1稀释;β-胡萝卜素:80ug/ml,正己烷溶解,再用初始流动相1:1稀释;
色谱条件:
色谱柱(货号):Acclaim C30
4.6×150 mm,3 μm(货号:075723)
流动相:A:甲醇:乙腈:水=73.5:24.5:2
B:甲基叔丁基醚
流速:1mL/min
检测器:UV,450nm
柱温:20℃
进样量:20μL
仪器:Ultimate 3000
结论
按照国标GB5009.83-2016分析胡萝卜素异构体,可以实现α-胡萝卜素和β-胡萝卜素2.39的分离度。且方法重现性良好。
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