液相色谱仪色谱柱使用及维护

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来源：江苏维林科生物技术有限公司 2017年08月18日 17:46

液相色谱仪使用卡套柱时，两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗，任何时候都不能将卡套取下来，否则会造成填料的流失。

　　卡套柱的安装(加预柱)

　　1.将卡套架套入柱芯

　　2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽，使夹套高于柱芯(见下图)

　　3.将已套到柱芯上的卡套架向上推，直至高过夹套片

　　4.将"预柱放入卡套片内

　　5.将卡套帽和卡套架旋在一起，然后用手拧紧

　　6.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端

　　平衡色谱柱

　　反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"。

　　硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡

　　如何平衡色谱柱？

　　平衡过程中，将流速缓慢地提高

　　用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低，则需要较长的时间来平衡)

　　色谱柱的再生　　进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，我们建议不使用您的液相色谱仪上的泵。

　　表1　建议用来冲洗的溶剂体积

　　注意：

　　在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离子的形式存在，因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液*流出。

　　**如果简单的有机溶剂/水的处理不能够*洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。

　　色谱柱的维护

　　1.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)

　　2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围

　　3.避免流动相组成及极性的剧烈变化

　　4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理

　　5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存大乙腈中

　　6.压力升高是需要更换预柱的信号

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