FICOLL PLUS 不连续密度梯度分离液使用说明

FICOLL PLUS 不连续密度梯度分离液使用说明

技术文档编号：TBD0054SOP

ICLL PLUS不连续密度梯度分离液与梯度制备稀释液配比稀释后，可形成不同浓度（密度）梯度分离液，经低速（200-1000g）离心于数分至数十分钟内可达到满意的细胞分离效果。FICOLL PLUS 不连续密度梯度分离液不穿透细胞，无毒害，成功的用于动物细胞的分离。

试剂组成

名称：FICOLL PLUS 密度梯度原液 货号：P1114  100ml  梯度制备稀释液 100ml

【简介】

FICOLL PLUS 不连续密度梯度分离液与梯度制备稀释液配比稀释后，可形成不同浓度（密度）梯度分离液，经低速（200-1000g）离心于数分至数十分钟内可达到满意的细胞分离效果。FICOLL PLUS 不连续密度梯度分离液不穿透细胞，无毒害，成功的用于动物细胞的分离。

【操作方法】

• 不同浓度（密度）分离溶液的制备，使用梯度制备稀释液参考下表将原液稀释至所需浓度：

• 梯度分离层的制备：将梯度分离液由高密度至低密度逐层加入至离心管内，加入后应可见明显的梯度界面。
• 上样：根据不同目的细胞，加入不同体积血液样品或单细胞悬液（样本体积及细胞浓度不宜过高，否则影响细胞的分离及回收）。
• 离心：400-600g 离心 20-30min。根据不同样本个体差异及目的细胞特点，用户可适当调节离心力及离心时间（离心力zui大不超过 1000g）。
• 取样：当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时，可逐层去除分离溶液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于分离液层中,则需要逐层收集。收获含有分离液的细胞经 2 次洗涤后可供培养或检测用。

【注意事项】

• 实验全过程需在 20℃±2℃下进行，否则影响离心效果。
• 由于多层分离溶液之间密度差别不大，因此离心机加速、降速时要慢，要平稳。
• 试剂瓶盖需盖紧，防止蒸发和污染。

【储存条件及有效期】常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。

【特殊细胞分离试剂盒举例】

1. 富含 NK 活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化试剂盒（产品货号：NK2011H）

• 淋巴母细胞纯化和死细胞去除试剂盒（产品货号：P1114B）
• 【人不同血细胞的漂浮密度】