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HE染色实验

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更新时间:2024-03-28 13:40:07浏览次数:125次

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HE染色实验伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH在胞浆蛋白质等电点(4.7—5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。

苏mu精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏mu精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏mu精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。

HE染色实验分化作用

染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所用的溶液称为分化液。在HE染色中用0.5%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏mu精的醌型结构,使组织与色素分离而褪色。经苏mu精染色后,必须用0.5%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏mu精染料和细胞浆吸附的苏mu精染料脱去,在进行伊红染色,才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。因此,在HE染色中分化是极为关键的一步。

HE染色实验返蓝作用

分化之后,苏mu精在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色,在碱性条件下处于蓝色离子状态,呈蓝色。组织切片经0.5%盐酸乙醇分化后呈红色或粉红色,故分化之后,立即用水出去组织切片上的酸而终止分化,再用弱碱性水(0.2%氨shui)使苏mu精染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。


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