| 供货周期 |
一个月 |
应用领域 |
化工,生物产业,制药/生物制药 |
人可替丁试剂盒用于检测人样本中可替丁含量，采用双抗夹心 ELISA 法。操作有序，从样本准备到结果测定，需留意多项要点，保障检测精准。
人可替丁试剂盒介绍
人可替丁试剂盒，在医学研究与临床检测中占据重要地位，主要用于精准测定人血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中的可替丁含量。可替丁作为一类抗菌肽，在人体先天性免疫防御体系里发挥关键作用，对其含量的检测有助于深入探究机体免疫状态以及相关疾病的发病机制。
一、检测原理
该试剂盒多采用双抗体夹心 ELISA 法。在试剂盒内，预先将针对人可替丁的特异性抗体稳固包被于酶标板孔底部。当进行检测时，把标准品或待测样本添加至酶标板孔中。样本里的可替丁会迅速与包被在孔底的抗体特异性结合，经过一段时间的温育，未结合的杂质通过洗涤步骤被去除。随后，加入酶标记的可替丁抗体，此抗体能够与已经结合在包被抗体上的可替丁再次结合，形成稳固的 “包被抗体 - 可替丁 - 酶标抗体" 免疫复合物。完成结合反应后，再次进行洗涤操作，去除未参与反应的多余酶标抗体。紧接着，向各孔中添加显色底物。在酶的催化作用下，原本无色的底物发生化学反应，转变为蓝色产物。反应一段时间后，添加终止液，反应停止，溶液颜色由蓝色转变为黄色。通过酶标仪在特定波长（一般为 450nm）下测量各孔溶液的吸光度（OD 值）。由于溶液颜色的深浅与样本中可替丁的含量呈正相关，所以依据标准品的 OD 值绘制标准曲线，便能准确推算出待测样本中可替丁的浓度。
二、操作步骤
样本准备：血清样本需在空腹状态下采集，采集后静置使其自然凝固，随后离心获取上层血清；血浆样本则依据不同抗凝剂要求采集，离心处理后备用；组织匀浆要按照规范方法制备，确保样本的均一性与稳定性。
试剂准备：将试剂盒从冰箱取出，室温平衡 30 分钟。按说明书要求，用蒸馏水将浓缩洗涤液稀释成工作洗涤液。
加样：在酶标板上准确设置标准品孔、空白孔与待测样本孔。标准品孔加入不同浓度的标准品，空白孔不加任何试剂，待测样本孔加入适量处理好的样本。
温育与洗涤：加样完毕后，封板，37℃温育相应时间。温育结束，弃去孔内液体，用洗涤液反复洗涤酶标板，去除未结合物质。
后续反应与检测：依次加入酶标抗体、显色底物，按规定时间温育与显色，最后加入终止液终止反应。使用酶标仪在 450nm 波长下测定各孔 OD 值，依据标准曲线计算样本中可替丁浓度。
三、注意事项
试剂盒使用前必须充分平衡至室温，防止温度差异影响检测结果。
样本采集与处理过程务必严格遵循规范，避免溶血、脂血等异常样本干扰检测。
洗涤过程要彻di，确保去除杂质，但也要防止过度洗涤导致已结合物质脱落。
加样时要准确、快速，尽量减少各孔间加样时间差异，保证实验条件的一致性。
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