数据非依赖采集(Data-Independent Acquisition, DIA)是当前 热门的质谱采集技术之一,它以非目标的方式将质量范围 分为若干窗口,依次并循环采集窗口内所有母离子的二级碎片 [1,2]。DIA 与 SRM 类似,也是基于子离子(transition)定量, 相比传统蛋白质组学定量方法具有更好的选择性和更高的准确 度。然而,目前DIA在翻译后修饰分析上仍有较大瓶颈。DIA 依赖于 DDA 建立谱图库,而 DDA 数据在搜库鉴定时,修饰 位点定位错误的概率较高,特别是磷酸化修饰发生在常见的 S/T/Y 上,若肽段含有 2 个或以上位置接近的 S/T/Y,位点就 容易找错。将含有错误位点信息的鉴定结果作为谱图库,就会 导致翻译后修饰 DIA 解析结果的不可靠[3]。因此,DIA 尚难用 于大规模的翻译后修饰样本分析。
质谱条件 质谱仪:Orbitrap Fusion(Thermo Scientific); 离子源:NanoFlex;离子模式:正离子;喷雾电压:1.8 kV; 毛细管温度:275°C;S-Lens RF:60%
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赛默飞色谱及质谱 | 下载次数 |
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