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RP-HPLC-MS方法分析几种蛋白的胰蛋白酶酶解多肽产物的条件优化

阅读:804      发布时间:2018-03-29
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引言 在生物体内,蛋白的翻译后修饰过程是蛋白发挥各种不 同生化功能的基础,这些翻译后修饰包括糖基化、氧化、 甲基化和磷酸化等。作为生物药物的蛋白在生产、运输、 保存过程中会产生变体,从而影响到药物的活性和稳定 性。因此蛋白的肽谱经常被用来研究蛋白的翻译后修饰 过程以及蛋白变体的存在。同时也用于生物制药行业蛋 白产品初级结构的确认 [1-3] ,从而更好地控制生化药品的 质量和确保病人的用药安全。 本文采用胰蛋白酶酶解蛋白的方法,得到各种蛋白的肽 谱,比较几款不同的反相色谱柱在分离蛋白酶解片断时 的差异,同时借助质谱,评价蛋白酶解产物 - 多肽在酸性 或者碱性流动相条件下表现出分离性能的差异。

仪器配置 Thermo Ultimate 3000

系统:泵:DGP-3600RS;自动进样器: WPS-3000TRS;柱温箱:TCC-3000RS;检测器:DAD-3000RS

质谱:TSQ Vantage

色谱软件:Chromeleon 6.8

提供商

赛默飞色谱及质谱

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