一、色谱柱简介
Ultimate®XB-C18 色谱柱采用超纯硅胶为基质,进行双封尾键合工艺;具有宽的pH 使用范围(1.5-10),适应于大部分药物,环境和化工行业的化合物分离,对碱性和极性化合物具有最佳的峰形,是目前市场上的C18 分析柱之一,可替代 Waters Symmetry C18, Agilent Zorbax XDB C18, Phenomenex Luna C18, Supelcosil LC-18-DB, YMC ODS-AM, Alltima C18, GL-science Inertsil ODS-2 等。
二、色谱柱特点
超纯全多孔球形硅胶,纯度>99.999%固定相键合、双封尾技术
高柱效:理论塔板数> 90000/ 米
良好的峰形对称性:拖尾因子控制在0.95-1.05
较宽pH范围:适合pH 值 1.5-10.0 较长的使用寿命
优良的批与批重现性
三、色谱柱参数
键合相 | C18 |
粒径 | 3µm,5µm,10µm, |
孔径 | 120Å , 300Å |
比表面积 | 320m2/g (120Å),90m2/g (300Å) |
载碳量 | 17%(120Å),8%(300Å) |
封尾 | 双封尾 |
pH 值稳定性 | 1.5-10.0 |
四、新柱活化
采用80%甲醇0.5ml/min 冲洗4小时,再换成分析流动相平衡;如果流动相 中含有缓冲盐,请使用过渡流动相过渡后再换分析流动相平衡;
五、 日常维护
1、建议检测前样品和流动相进行过滤;
2、建议每天做完样品后及时进行清洗;
3、常规检测,测试完后直接把色谱柱反向连接采用90%有机相冲洗45min,最后保存;
4、使用缓冲盐条件:
1)等度条件:使用缓冲盐之前和之后都用过渡流动相以分析流速冲洗45min;
2)梯度条件:使用缓冲盐之前与初始流动相组成相同的过渡流动相以分析流速冲洗45min;
注意:过渡流动相是指有机相和水相比例与分析流动相相同比例,只是不含有缓冲盐;
3)缓冲盐冲洗干净后,采用90%有机相反向冲洗 60min,最后保存;注意:缓冲盐溶液不能存留色谱柱中过夜;
5、色谱柱的保存
1)短时间内色谱柱的保存
如果使用时间间隔不超过四天,保存到最后的有机溶剂水里面即可。
2)长时间色谱柱的保存
如色谱柱长时间不用,最后采用80%甲醇水用分析流速冲洗45min,将其从 HPLC仪中取下,用塑料塞头将其密封,以免色谱柱内溶剂挥发。
六、注意事项
1)Ultimate®XB-C18 色谱柱使用 pH 范围在 1.5~10.0,通常建议使用范围 pH 为 2.0~8.0 比较合适,流动相超出pH 范围将会导致硅胶基质流失和键合相 断裂使柱效下降,使用寿命变短,所以要严格控制pH 范围;
2)Ultimate®XB-C18 色谱柱使用流动相中有机溶剂比例要求在5%以上,如果有机相过低,易导致“相塌陷",使保留时间、分离度等不能重现。
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