东京理化EYELA在普洱茶茶褐素分离研究的应用

为了了解解普洱茶茶褐素的组成，对从普洱茶中提取的茶褐素进行了分离。通过比较不同树脂对茶褐素的吸附与解吸能力，选择AB－8 大孔树脂对普洱茶茶褐素进行分离，得到TBsP1 和TBsP2 两个组分; 进一步利用DEAE－52 纤维素柱对TBsP1 组分进行分离，得到6 个组分; 对茶褐素组分TBsP1、TBsP2 以及TBsP1 分得到的6 个组分的总糖、总酚和蛋白质的含量进行了分析，并进一步对各组分的单糖组成进行了分析。

    普洱茶是我国*的，采用云南大叶种晒青毛茶经渥堆发酵制成，渥堆发酵过程中，茶多酚在微生物作用及湿热作用下被氧化成茶黄素、茶红素，茶黄素和茶红素进一步氧化聚合，并结合多糖、蛋白质、脂质等化合物形成茶褐素。茶褐素能溶于水而不溶于乙酸乙酯和正丁醇，是一类十分复杂的化合物，具有抗癌、减肥降脂、抗疲劳等活性功能，化学组成及结构有待探明。

    目前关于茶黄素的研究为深入，已制备得到多种茶黄素单体，茶红素的研究也取得一定进展，茶褐素则由于其组成、结构复杂，极性很大，分离纯化的难度高，其研究进展缓慢。等利用原子力显微镜对不同分子量的茶褐素进行观察，发现不同分子量的茶褐素粒子形貌并不均一。利用硅胶层析对茶褐素进行分离，发现茶褐素为多羟基物质，含有烷基、羧基及苯环，主要的糖单位为葡萄糖。等利用sephadex－LH20 对茶褐素进行分级，得到六个级分，这些级分由儿茶素以外的多酚、蛋白质及多糖组成，但是各组分中总酚、总糖和蛋白质含量不同。

    仪器：N－1100 旋转蒸发仪日本东京理化; UV5200

    本文通过利用AB－8 树脂将茶褐素分离成两种不同的极性的组分，两个组分总糖、总酚、蛋白质含量不同，TBsP1 中多糖含量较高，TBsP2 中总酚含量高。两组分的单糖组成上也有区别尤其是GalA 和Glc 的摩尔百分比差异较大。TBs－P1 组分经DEAE－52 分离后得到六种不同性质的组分，各个组分总糖、总酚和蛋白质含量均有区别，说明经过AB － 8 树脂和DEAE－52 树脂分步层析分离，可以将不同性质的茶褐素组分进行分离。不同组分中多糖、多酚和蛋白质的结合程度也有所不同。茶褐素的主要分离组分单糖组成相似，各种单糖的摩尔百分比有差别，但与晒青毛茶相比差异较大，说明普洱茶发酵过程中，原料的糖类物质经微生物作用发生变化，并与多酚和蛋白质结合形成了茶褐素。有关普洱茶发酵过程中茶褐素形成方式、单糖组成的变化，各组分的结构特定、生理活性等还有待研究。