产品简介：

本产品是专门用于从昆虫、节肢动物、蛔虫、扁形虫和一些富含多糖的动物组织中提取基因组 DNA 的试剂盒。其原理是基于去垢剂在适当的离子强度条件下，特异地跟基因组 DNA 结合形成沉淀，然后在用硅胶膜离心吸附法进行进一步纯化得到 DNA。

产品特点：

1.适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的动物，包括昆虫、节肢动物、蛔虫和扁形虫等。

2.除新鲜样品外，还适合于各种保存状态的样品，包括冷冻的样品、用乙醇保存的样品和福尔马林保存的样品。

3.提取到的基因组 DNA 完整性，长度一般在 20-50 Kb。

4.DNA 纯净，OD260/280 一般都在 1.8 左右，可直接用于 PCR、酶切和杂交等。

5.操作简单，整个过程约 30 分钟。

6.安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

7.本产品足够 50 次微量提取，每次可以处理 0.1-0.3 g 昆虫样品。

8.昆虫DNA纯化试剂盒（过柱法）只能用于科研。

产品参数：

成分规格包装材料

昆虫DNA 纯化试剂溶液A50 mL60 mL 本色瓶

昆虫DNA 纯化试剂溶液 B50 mL60 mL 本色瓶

昆虫DNA 纯化试剂溶液 C50 mL60 mL 本色瓶

离心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶

DNA 洗脱液（基因组纯化专用）10 mL10 mL 本色瓶

使用手册1 份1 份

运输及保存

常温运输及保存，有效期一年。

自备试剂

氯仿。

相关资料：

1.称取 0.1-0.3 g 昆虫样品转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉后转移到一个干净的 1.5 mL 塑料离心管中。

注意：最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵，因为 DNA 会吸附在表面，影响得率。

2.在离心管中加入 1 mL 65℃预热的昆虫 DNA 纯化试剂溶液 A 并用移液枪头充分吹打混匀(如果昆虫DNA纯化试剂溶液A有沉淀，需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。

3.65℃保温 5-30 分钟，其间最好吹打混匀 2-3 次。

4. 12,000-15,000×g 室温离心 3 分钟。

5.将不超过 0.75 mL 的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。

6.在上清液中加入等体积的昆虫DNA 纯化试剂溶液 B，上下颠倒 30 秒充分混匀，溶液将呈白色混浊。

7.将其置于冰浴中放置 5-10 分钟。

8.12,000-15,000×g 室温离心 3 分钟，转移上清到新的 1.5 mL 塑料离心管中。

9.加入 0.2mL 的氯仿(自备)，震荡器上充分振荡 30 秒混匀。

10.12,000-15,000×g 室温离心 3 分钟，两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清到新 1.5-5 mL 塑料离心管中。注意：由于下一步要加 1.5 倍体积的昆虫DNA 纯化试剂溶液 C，所以新的离心管的体积要足够大。

11.加入 1.5 倍体积的昆虫DNA 纯化试剂溶液 C，上下颠倒 30 秒混匀，然后分多次的将混合液转移到离心吸附柱中。

12.每次转移 0.7-0.8 mL 混合液后，室温放置 5-10 分钟。13. 12,000-15,000×g 室温 1 分钟，弃穿透液。

14.对需要多次上柱的样品，可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中，重复第 12-14 步的操作。

15.将 0.7 mL 通用洗柱液加入离心柱，室温离心 1 分钟，弃穿透液。

16.在离心吸附柱中加入 0.3 mL 的通用洗柱液，12,000-15,000×g 离心半分钟(此步为第二次洗涤)。

17.空甩 1 分钟去除残留液体。

18.将离心柱放置在一新的 1.5 mL 塑料离心管中，加入 30-100 μL DNA 洗脱液 2.0。

19.室温放置 5 分钟后离心 1 分钟，管底即为昆虫 DNA 溶液，可立即使用，也可长期保存在－20℃。

20.可以重复上步一次，以洗脱更多的 DNA。

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