产品简介：

猪流感是由猪流感病毒（SIV）引起的一种急性高度接触传染性猪呼吸道疾病，临床以突发、高热、咳嗽、  呼吸困难、衰竭、高发病率、低死亡率为特征。目前已发现的 SIV  至少有 9  种不同的血清亚型。H1H1  型猪流感是广泛流行于猪群流感之一。 

本试剂盒适用于检测的肺脏、气管分泌物、鼻-拭子样品等标本中猪流感 H1N1 病毒 RNA，适用于猪流感病毒感染的辅助诊断。 

产品特点：

一、严格的质控体系

所有试剂盒从原料到成品都经过严格的质量控制，确保每一盒试剂盒都具有稳定可靠的质量，让您的检测结果更可信。

二、高灵敏度

产品经过不断优化，具有出色的灵敏度，能够检测到极微量的猪流感H1N1病毒核酸，不放过任何潜在的感染风险。

三、便捷操作

综合各项指标特性，研发出操作便捷的试剂盒。从样本制备到结果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能轻松上手。

四、多样的检测验证样本

该试剂盒经过多种样本的检测验证，适用于肺脏、气管分泌物、鼻-拭子等多种常见样本，满足不同的检测需求。

五、个性化定制服务

专业的研发团队可为您提供个性化的定制服务，根据您的特殊需求进行产品优化和调整，为您提供更贴合实际的检测方案。

六、丰富的产品线

除了猪流感H1N1病毒（SIV-H1N1）双重PCR试剂盒，我们还提供Elisa试剂盒以及其它快检试剂盒，满足您在不同领域的检测需求。

七、完善的售前售后服务

我们拥有完善专业的售前售后服务团队，在您购买前为您提供详细的产品咨询和技术支持，购买后为您解决使用过程中遇到的任何问题，让您无后顾之忧。

产品参数：

产品规格

50T/盒，可满足一定规模的检测需求。

检测方法

实时荧光PCR，具有快速、准确、灵敏等优点。

适用仪器

ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

标本采集

病死猪，取肺脏、气管分泌物；待检活猪，用棉拭子深入鼻腔取分泌物，置于 1mL 50%甘油生理盐水中。

保存和运输

采集或处理好的样品在 2℃~8℃条件下保存应不超过 24 h；若需长期保存，应放置-70℃以下保存，冻融不超过 3 次。

使用方法：

1.样品处理（样本处理区） 

1.1样本前处理 

组织样品：称取样品约 1g，剪碎混匀后于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL 灭菌离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；气管、鼻腔分泌物取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中。 

1.2核酸提取 

推荐采用公司生产的核酸-提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作。 

2.试剂配制（试剂准备区） 

根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表： 

试剂 SIV-H1N1 反应液 酶液 

用量 19μL1μL

将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，20μL/管。 

3.加样（样本处理区） 

将步骤 1 提取的 RNA、阳性质控品、阴性质控品各取 5μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀， 短暂离心。 

4.PCR 扩增（核酸扩增区） 

4.1将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内； 

4.2设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL；荧光通道选择： 

检测通道（Reporter Dye）FAM、ROX， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，请勿选择 ROX 参比荧光。 

4.3推荐循环参数设置： 

5.结果分析判定 

步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号 

11 cycle50℃ 10min否 

21 cycle95℃ 2min否 

345 cycles95℃ 15sec否 

60℃ 30sec是 

5.1结果分析条件设定（请参照各仪器使用说明书进行设置，以分析 ABI7500 仪器为例） 

反应结束后自动保存结果，根据分析后图像调节 Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用户可根据实际情况自行调整，Start 值可设在 3～15、End 值可设在 5～20，使阈值线位于扩增曲线指数期，阴性质控品的扩增曲线平直或低于阈值线），点击 Analyze 自动获得分析结果。 

5.2结果判断 

FAM 通道为猪流感 H1N1 病毒 H1 基因检测结果，ROX 通道为猪流感 H1N1 病毒 N1 基因检测结果。阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线； 

阴性：样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。 

5.3质控标准 

阴性质控品：无特异性扩增曲线或无 Ct 值显示； 

阳性质控品：扩增曲线有明显指数增长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。 

6.检测方法的局限性 

1.样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关； 

2.样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果； 

3.阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果； 

4.病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果； 

5.不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果； 

6.试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果； 

7.本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。 

注意事项：

1.所有操作严格按照说明书进行；

2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完-全混匀并短暂离心；

3.反应液应避光保存；

4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

9.本产品仅供科研。

选择我们的猪流感H1N1病毒（SIV-H1N1）双重PCR试剂盒，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！