产品简介：

本试剂盒适用于动物组织以及食品、饲料等样本中鹿源性成分的检测。检测结果仅供参考。

产品特点：

一、严格的质控体系

所有试剂盒从原料到成品都经过严格的质量控制，确保每一盒试剂盒都具有稳定可靠的质量，让您的检测结果更可信。

二、高灵敏度

产品经过不断优化，具有出色的灵敏度，能够检测到极微量的鹿源性成分核酸，不放过任何潜在的感染风险。

三、便捷操作

综合各项指标特性，研发出操作便捷的试剂盒。从样本制备到结果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能轻松上手。

四、多样的检测验证样本

该试剂盒经过多种样本的检测验证，适用于动物组织以及食品、饲料等多种常见样本，满足不同的检测需求。

五、个性化定制服务

专业的研发团队可为您提供个性化的定制服务，根据您的特殊需求进行产品优化和调整，为您提供更贴合实际的检测方案。

六、丰富的产品线

除了鹿源性成分（Deer）荧光PCR检测试剂盒，我们还提供Elisa试剂盒以及其它快检试剂盒，满足您在不同领域的检测需求。

七、完善的售前售后服务

我们拥有完善专业的售前售后服务团队，在您购买前为您提供详细的产品咨询和技术支持，购买后为您解决使用过程中遇到的任何问题，让您无后顾之忧。

产品参数：

产品规格

50T/盒，可满足一定规模的检测需求。

检测方法

实时荧光PCR，具有快速、准确、灵敏等优点。

适用仪器

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

标本采集

取动物组织及其制品、食品或饲料约 1g，转至含 1.5mL 无菌生理盐水的洁净离心管送检。

保存和运输

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃。但不能超过 6 个月，标本运送应采用 0℃冰壶。

使用方法：

1.样品处理（样本处理区）

1.1参照 SN/T2980-2011 标准的提取方法，如下：

1.1.1试剂配置

1)1mol/L Tris-Cl（pH8.0）：称取 Tris 121.1g，加入 ddH2O 800mL 溶解，冷却至室温后弄 3M 浓盐酸调 PH 至 8.0，加 ddH2O 定容至 1L，分装灭菌。

2)CTAB 裂解液：800mLddH2O 加入 40.95g NaCl，10g CTAB（十六烷基三甲基溴-化铵）；完-全溶解后加入 1mol/L Tris-Cl（pH8.0）50mL，0.5mol/L EDTA

（pH8.0）20mL，磁力搅拌器剧烈搅动拌用氢氧化钠调节 pH 至 8.0，水定容至1L，分装灭菌；

1.1.2DNA 提取

取 100mg 左右样品于 1.5mL 离心管中，加入 600-800μL 预冷的 CTAB 裂解液， 65℃水浴 30min，每隔 10min，振荡混匀一次；100℃沸水浴 5min；12000r/min离心 5min，吸取上清液至一新的离心管中，加 400μL 氯仿+异戊醇混合液（体积比 24：1），充分混匀后 12000r/min 离心 10min，吸取上清液至新的离心管中，加0.8 倍体积的异丙醇，-20℃下沉淀DNA 30min；12000r/min 离心10min，弃去上清液；75%乙醇轻柔地洗涤沉淀一次，12000r/min 离心 8min，弃液体， 晾干；加入 100μL 1xTE，充分溶解沉淀;

1.2核酸稀释（油脂类饲料不必进行此步骤）

提取的 DNA 用紫外分光光度计进行浓度测定，取 5μL 提取好的 DNA，1mL ddH2O，用 ddH2O 做对照，测定 260nm 和 280nm 的吸光度 A260 和 A280，DNA 的浓度 c=A260x10μg/μL（当 A260/A280 比值在 1.7~1.9 之间时，DNA 模版纯度适宜扩增）。

2.试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：

试剂Deer 反应液酶液

用量20μL1μL

3.加样（样本处理区）

将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。

4.PCR 扩增（核酸扩增区）

4.1将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；

4.2设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25ul；荧光通道选择： 检测通道

（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

4.3推荐循环参数设置：

步骤循环数温度时间收集荧光信号

11 cycle95℃10min否

240 cycles94℃15sec否

55℃30sec是

结果分析判定

5.1结果分析条件设定

设置 Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节)，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。

5.2判断

a)检测通道 Ct 值≤30，有 FAM 荧光信号检出，并出现典型的扩增曲线，判断样品为阳性。

b)当 30<Ct 值≤35 时，且有典型的扩增曲线时，则需重复实验。再次扩增后检测体系的Ct 值仍≤35，且有典型的扩增曲线，则判定该样品含有相应的动物源性成分。当再次扩增后，检测体系 Ct 值＞35，或无典型的扩增曲线，则判定该样品不含相应的动物源性成分。

6.质控标准

a)空白对照：无FAM 荧光信号检出或 Ct 值≥35，未出现典型的扩增曲线。

b)阴性对照：无FAM 荧光信号检出或 Ct 值≥35，未出现典型的扩增曲线。

c)阳性对照：有 FAM 荧光信号检出，并出现典型的扩增曲线，Ct 值＜30。

d)以上应同时满足，否则本次实验无效。

7.检测方法的局限性

7.1样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；

7.2样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；

7.3阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；

7.4病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；

7.5不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；

7.6试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；

7.7本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。

注意事项：

1.所有操作严格按照说明书进行；

2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完-全混匀并短暂离心；

3.反应液应避光保存；

4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

9.本产品仅供科研。

选择我们的鹿源性成分（Deer）荧光PCR检测试剂盒，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！