产品简介：

犬冠状病毒（Canine coronavirus，CCoV）和猫冠状病毒（feline coronavirus,FCoV）基因组结构相似，均为α 冠状病毒属，单股正链 RNA 病毒。CCoV 和 FCoV 感染主要导致胃肠道病变，分子流行病学显示，目前这两种病毒在犬群和猫群中传播广泛，对宠物犬猫饲养者、从业爱好者及销售者等危害巨大。

犬冠状病毒感染犬只后主要引起消化道系统感染，通常死亡率不高，发病时表现为呼吸急促、精神不振、食欲下降，之后出现腹痛、腹泻，粪便呈水样并具有腥臭味，常伴有便血。猫冠状病毒主要通过口鼻传播，主要感染幼年和老龄猫。猫冠状病毒主要包括两种：猫肠道冠状病毒（Feline enteric coronavirus,FECV）和猫传染性腹膜炎病毒（Feline infectious peritonitis viurs,FIPV）。其中 FECV 的感染仅局限于消化道，致死率较低；FIPV 为高毒力突变株，致死率高，是目前最常见的致命性猫科病毒，发病时出现食欲下降、精神萎靡、体态消瘦和腹泻的情况，渗出型腹膜炎的猫只还会伴有腹腔肿大的情况。

本试剂盒适用于检测犬粪便样本；猫 EDTA 抗凝全血、胸腹水、粪便样本。

产品特点：

一、严格的质控体系

所有试剂盒从原料到成品都经过严格的质量控制，确保每一盒试剂盒都具有稳定可靠的质量，让您的检测结果更可信。

二、高灵敏度

产品经过不断优化，具有出色的灵敏度，能够检测到极微量的犬猫冠状病毒核酸，不放过任何潜在的感染风险。

三、便捷操作

综合各项指标特性，研发出操作便捷的试剂盒。从样本制备到结果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能轻松上手。

四、多样的检测验证样本

该试剂盒经过多种样本的检测验证，适用于犬粪便样本；猫 EDTA 抗凝全血、胸腹水、粪便样本等多种常见样本，满足不同的检测需求。

五、个性化定制服务

专业的研发团队可为您提供个性化的定制服务，根据您的特殊需求进行产品优化和调整，为您提供更贴合实际的检测方案。

六、丰富的产品线

除了犬猫冠状病毒（CFCoV）荧光PCR检测试剂盒，我们还提供Elisa试剂盒以及其它快检试剂盒，满足您在不同领域的检测需求。

七、完善的售前售后服务

我们拥有完善专业的售前售后服务团队，在您购买前为您提供详细的产品咨询和技术支持，购买后为您解决使用过程中遇到的任何问题，让您无后顾之忧。

产品参数：

产品规格

50T/盒，可满足一定规模的检测需求。

检测方法

实时荧光PCR，具有快速、准确、灵敏等优点。

适用仪器

ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

标本采集

血样：压迫猫肘部前臂头静脉怒张，绷紧头静脉两侧皮肤，采样针头斜面朝上、呈 15°角由远心端向近心端刺入静脉血管，见有血液回流时，缓慢抽取血液或接入 EDTA 抗凝真空采-血管。

胸腹水：应采用烫烙法消毒采样部位，用灭菌注射器经烫烙部位插入，吸取内部液体病料，然后将病料注入灭菌的试管中。

粪便：一般采集新鲜粪便，或采用棉拭子进行直肠采样或泄殖腔采样。采集肛拭子样品时，取无菌棉拭子插入畜禽肛-门或泄殖器腔中，旋转 2 圈~3 圈，刮取直肠黏液或粪便，放入装有 30%甘油磷酸盐缓冲液（配制方法见 NY/T541-2016 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范）中送检。粪便样品采集后应低温运送至实验室并尽快检测，以防止样品中待检病原死亡、细菌增值或虫卵孵化。

保存和运输

采集或处理好的样品在 2℃~8℃条件下保存应不超过 24 h；若需长期保存，应放置-70℃以下保存，冻融不超过 3 次。

使用方法：

1.样品处理（样本处理区）

1.1样本前处理

将棉拭子充分捻动、挤干后弃去拭子；粪便样本加 PBS 充分混合，按照 1g 组织加 10 mL PBS 的比例配成悬液；将采集的全血加入 EDTA 抗凝剂后充分混合。样品液经 3000r/min 离心 10 min，取上清作为核酸检测材料。

1.2核酸提取

推荐采用公司生产的核酸-提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取， 请按照试剂说明书进行操作。

2.试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：

试剂CFCoV 反应液酶液

用量19μL1μL

将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，20μL/管。

3.加样（样本处理区）

将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 5μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀， 短暂离心。

4.PCR 扩增（核酸扩增区）

4.1将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；

4.2设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL；荧光通道选择：

检测通道（ReporterDye）FAM，淬灭通道（QuencherDye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光， 选择 None 即可。

4.3推荐循环参数设置：

步骤循环数温度时间收集荧光信号

11 cycle50℃10min否

21 cycle95℃2min否

345 cycles95℃15sec否

60℃30sec是

5.结果分析判定

5.1结果分析条件设定（请参照各仪器使用说明书进行设置，以分析 ABI7500 仪器为例）

反应结束后自动保存结果，根据分析后图像调节 Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用户可根据实际情况自行调整，Start 值可设在 3～15、End 值可设在 5～20，使阈值线位于扩增曲线指数期，阴性质控品的扩增曲线平直或低于阈值线），点击 Analyze 自动获得分析结果。

5.2结果判断

阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线； 阴性：样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。

5.3质控标准

阴性质控品：无特异性扩增曲线或无 Ct 值显示；

阳性质控品：扩增曲线有明显指数增长期，且 Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。

6.检测方法的局限性

1.样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；

2.样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；

3.阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；

4.病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；

5.不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；

6.试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；

7.本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。

注意事项：

1.所有操作严格按照说明书进行；

2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完-全混匀并短暂离心；

3.反应液应避光保存；

4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

9.本产品仅供科研。

选择我们的犬猫冠状病毒（CFCoV）荧光PCR检测试剂盒，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！