产品简介：

猪链球菌是一种重要的人兽共患病病原菌，根据菌体荚膜多糖的多样性，猪链球菌被分为35个血清型，猪链球菌2型（Streptococcus Suis Type 2，SS-2）致病力最-强，也是国内最常见的致病血清型。他能引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症、肺炎和突然死亡，各年龄段猪均可感染猪链球菌，但以3-12周龄猪，尤其断奶仔猪最易感，该病已成为严重影响各国养猪业发展的一种重要疾病。传统的细菌培养和免疫学法检测法，鉴定时间长，以分子生物学为基础的荧光PCR技术，因其才做简单、特异性强、灵敏度高，逐渐成为猪链球菌2型快速鉴定的主要手段之一。本试剂盒适用于检测扁桃体、内脏或肌肉、咽-拭子等样本中的猪链球菌2型，用于猪链球菌2型感染的辅助诊断 。

产品特点：

一、严格的质控体系

所有试剂盒从原料到成品都经过严格的质量控制，确保每一盒试剂盒都具有稳定可靠的质量，让您的检测结果更可信。

二、高灵敏度

产品经过不断优化，具有出色的灵敏度，能够检测到极微量的猪链球菌2型核酸，不放过任何潜在的感染风险。

三、便捷操作

综合各项指标特性，研发出操作便捷的试剂盒。从样本制备到结果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能轻松上手。

四、多样的检测验证样本

该试剂盒经过多种样本的检测验证，适用于扁桃体、内脏或肌肉、咽-拭子等多种常见样本，满足不同的检测需求。

五、个性化定制服务

专业的研发团队可为您提供个性化的定制服务，根据您的特殊需求进行产品优化和调整，为您提供更贴合实际的检测方案。

六、丰富的产品线

除了猪链球菌2型(SS-2)检测试剂盒(荧光PCR法)，我们还提供Elisa试剂盒以及其它快检试剂盒，满足您在不同领域的检测需求。

七、完善的售前售后服务

我们拥有完善专业的售前售后服务团队，在您购买前为您提供详细的产品咨询和技术支持，购买后为您解决使用过程中遇到的任何问题，让您无后顾之忧。

产品参数：

产品规格

50T/盒，可满足一定规模的检测需求。

检测方法

实时荧光PCR，具有快速、准确、灵敏等优点。

适用仪器

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

标本采集

病死或扑杀的猪，无菌剪取扁桃体、内脏或肌肉样品1g于研磨器中充分研磨，在加5mL PBS混匀；生猪取咽-拭子样品，采样时要将拭子深入喉头及上颚，来回刮3～5次取分泌液。

保存和运输

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输， 严禁反复冻融。 

使用方法：

1.样品处理（样本处理区）

1.1样本前处理

组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术-剪剪碎混匀后取0.5g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm 离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中；咽-拭子样品直接取100μL于1.5mL灭菌离心管中

1.2核酸提取 

推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的核酸-提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请按  照试剂说明书进行操作。 

2.试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N（N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份），每测试反应体系配制如下表： 

试剂 SS-2 反应液 酶液 

用量（样本数为 N） 20μL1μL

将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，21μL/管。 

3.加样（样本处理区）

将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀， 短暂离心。 

4.PCR 扩增（核酸扩增区）

4.1将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内；

4.2设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL；

荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 

ROX 参比荧光，选择 None 即可。 

4.3推荐循环参数设置：

步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号 

11 cycle95℃10min否 

240 cycles94℃15sec否 

55℃30sec是 

5.结果分析判定

5.1结果分析条件设定

设置 Baseline 和 Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值（一般可在 3~15 范围内调节）、stop 值（一般可在 5~20 范围内调节），以及 Threshold的 Value 值（上下拖动阈值线至高于阴性对照），重新分析结果。 

5.2结果判断

阳性：检测通道 Ct 值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线； 

可疑：检测通道 35<Ct 值≤38，建议重复检测，如果检测通道仍为 35<Ct 值≤38，且曲线有明显的增长曲线， 判定为阳性，否则为阴性； 

阴性：样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。 

6.质控标准

阴性质控品：Ct>38 或无 Ct 值显示； 

阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且Ct 值≤32； 以上条件应同时满足，否则实验视为无效。 

7.检测方法的局限性

1.样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关； 

2.样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果； 

3.阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果； 

4.病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果； 

5.不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果； 

6.试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果； 

7.本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。 

注意事项：

1.所有操作严格按照说明书进行；

2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完-全混匀并短暂离心；

3.反应液应避光保存；

4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

9.本产品仅供科研。

选择我们的猪链球菌2型(SS-2)检测试剂盒(荧光PCR法)，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！