产品简介：

猪圆环病是由猪圆环病毒（Porcine Circovirus）引起猪的一种传染性、先天性颤抖和断奶仔猪多系统功能障碍性疾病。该病毒具有 PCV1 和PCV2 两种血清型， PCV1 无致病性。PCV2 具有很强的免疫抑制作用，临床上常表现为多病原混合感染，PCV2 与断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）密切相关，还可引起猪皮炎与肾炎综合征、呼吸道综合征和 A2 型先天性震颤等疾病，给养猪业造成巨大经济损失。因此PCV2 感染早期诊断尤为重要。

本试剂盒适用于检测从肺、淋巴结组织、全血等标本中分离出的猪圆环病毒 2 型 DNA，用于猪圆环病毒 2 型的辅助诊断。

产品特点：

一、严格的质控体系

所有试剂盒从原料到成品都经过严格的质量控制，确保每一盒试剂盒都具有稳定可靠的质量，让您的检测结果更可信。

二、高灵敏度

产品经过不断优化，具有出色的灵敏度，能够检测到极微量的猪圆环病毒2型核酸，不放过任何潜在的感染风险。

三、便捷操作

综合各项指标特性，研发出操作便捷的试剂盒。从样本制备到结果分析，每一步都有清晰的操作指南，即使是新手也能轻松上手。

四、多样的检测验证样本

该试剂盒经过多种样本的检测验证，适用于肺、淋巴结组织、全血等多种常见样本，满足不同的检测需求。

五、个性化定制服务

专业的研发团队可为您提供个性化的定制服务，根据您的特殊需求进行产品优化和调整，为您提供更贴合实际的检测方案。

六、丰富的产品线

除了猪圆环病毒2型PCV-2检测试剂盒(荧光PCR法)，我们还提供Elisa试剂盒以及其它快检试剂盒，满足您在不同领域的检测需求。

七、完善的售前售后服务

我们拥有完善专业的售前售后服务团队，在您购买前为您提供详细的产品咨询和技术支持，购买后为您解决使用过程中遇到的任何问题，让您无后顾之忧。

产品参数：

产品规格

50T/盒，可满足一定规模的检测需求。

检测方法

实时荧光PCR，具有快速、准确、灵敏等优点。

适用仪器

ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

标本采集

病死或扑杀的猪，取肺、淋巴结等组织；待检活猪，用注射器取血 5mL。

保存和运输

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过 6 个月，标本运送应采用 2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

使用方法：

1.样品处理（样本处理区）

1.1样本前处理

组织样品：每份组织分别从 3 个不同的位置称取样品约 1g，手-术剪剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨，加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中； 全血样本：待血凝固后，取血清放于离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清 100 μL 于灭菌离心管中

1.2DNA 提取

采用上海烜雅生物科技有限公司生产的 DNA-提取试剂盒（离心柱提取法），请按照试剂盒说明书进行操作。

2.试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表：

试剂PCV-2 反应液

用量（样本数为 N）21μL

3.加样（样本处理区）

将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL，加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。

4.PCR 扩增（核酸扩增区）

4.1将待检测反应管置于 PCR 仪反应槽内；

4.2推荐循环参数设置：

步骤循环数温度时间

11 cycle94℃2min

2

35 cycles94℃30sec

58℃30sec

72℃60 sec

反应体系为 25μL；

5.电泳检测

1)2%琼脂糖凝胶配制：稀释 50×TAE 缓冲液至 1×TAE (取 20mL 50×TAE 缓冲液， 加 980mL 双蒸水至 1L)，称 4g 琼脂糖放于 500mL 锥形瓶中，1×TAE 缓冲液 200 mL，置入微波炉中加热熔解(避免加热沸腾溶液外溢)，再加入 10μL 染料充分混匀。在电泳槽内放好梳子，倒入琼脂糖凝胶，待凝固后使用；

2)电泳：在电泳槽中加入 1×TAE 缓冲液，使液面刚刚没过凝胶。用移液器取 10μ L PCR 扩增产物于琼脂糖凝胶孔中。加样后，以 5V/cm 电压，电泳 20-30min（每次电泳时，每隔 10min 观察一次。当加样缓冲液中溴酚蓝电泳过半至凝胶下 2/5 处时，可停止电泳）。电泳后，紫外灯下观察结果。

6.结果判定

阳性质控品出现 1154 bp 条带，阴性质控品不出现条带或只出现片段较小的引物二聚体条带，实验结果成立。被检样品出现 1154 bp 条带，判断为阳性，否则为阴性。

7.产品性能指标

试剂灵敏性 10-3 以上，特异性 100%，批间批内差异≤3%。

注意事项：

1.所有操作严格按照说明书进行；

2.试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完-全混匀并短暂离心；

3.反应液应避光保存；

4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；

5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；

6.样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；

7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；

8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

9.本产品仅供科研。

选择我们的猪圆环病毒2型PCV-2检测试剂盒(荧光PCR法)，就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！