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上海语纯生物科技有限公司
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具体成交价以合同协议为准
产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 5×10^5 |
|---|---|---|---|
| 货号 | BH0282 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号：BH0282
产品规格：5×10^5
本产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。
产品介绍
HFF-1人皮肤成纤维细胞
细胞详情 | |
细胞名称 | 人皮肤成纤维细胞HFF-1 |
货 号 | SAc0154 |
组织来源 | 新生男孩，皮肤，包皮 |
细胞形态 | 成纤维细胞 |
生长方式 | 贴壁生长 |
描 述 | 饲养层细胞， 供H1、H9、HN4、HN1等hES使用。 |
培养条件 | DMEM，15%FBS，丙酮酸钠；空气95%，二氧化碳5%；37℃培养 |
换液频率 | 2-3天 |
传代周期 | 3-4天 |
传代比例 | 1:3-1:6 |
冻存液配方 | 基础培养液，40%FBS，DMSO 10% |
安全性 | BSL-1 |
供应限制 | 仅供研究之用。 |
细胞操作详细步骤----贴壁细胞
1.细胞复苏
1.1离心法
1.1.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记，预热好的细胞专用培养基，一支15ml离心管，离心管中加入4-5ml细胞专用培养基。
1.1.2取出细胞冻存管，在37度水浴中快速解冻，将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.1.3将细胞悬液转移到加有培养基的离心管中，1000转离心5分钟。
1.1.4倒掉上清，加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
1.1.5将重悬好的细胞转移到T25细胞培养瓶，补充培养基到8ml左右，十字摇晃，将细胞铺匀后放入培养箱培养。
1.2不离心法
1.2.1准备一个T25的细胞培养瓶并做好标记，预热好的细胞专用培养基，培养瓶中加入8ml左右培养基。
1.2.2取出细胞冻存管，在37度水浴中快速解冻，将管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.2.3将细胞悬液转移到加有培养基的培养瓶中，十字摇晃，将细胞铺匀后放入培养箱培养，接种16小时后更换培养基。
2.细胞传代
2.1准备细胞专用培养基，细胞培养瓶，胰酶（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），DPBS。
2.2弃上清，并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。
2.3加入1ml胰酶，室温或者37度消化，直到细胞成片脱落，加入3-4ml专用培养基终止消化，如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。（注意：消化时间与所用胰酶效价，消化时候细胞密度以及温度等因素有关，建议第一次消化时候，多在显微镜下观察，以找到优良消化时间）
2.4收集细胞悬液，1000转离心5分钟，弃上清，加入培养基轻轻重悬细胞亦可先将细胞团弹散后加入培养基混匀。
2.5将重悬好的细胞按比例分装至T25细胞培养瓶，补充培养基到8ml左右，十字摇晃，将细胞铺匀后放入培养箱培养。
3.细胞冻存
3.1准备细胞冻存液，细胞冻存管，胰酶（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），DPBS。
3.2弃上清，并加2-3mlDPBS轻柔冲洗培养瓶内细胞1-2次。
3.3加入1ml胰酶，室温或者37度消化，直到细胞成片脱落，加入专用培养基终止消化，如果有成团块脱落的细胞可轻轻吹打分散细胞后再终止消化。
3.4收集细胞悬液，1000转离心5分钟，弃上清。
3.5加入冻存液，重悬细胞，并分装到冻存管，冻存密度0.8-1.5×106细胞/ml。
3.6将冻存管放入程序降温盒，并放到-80℃冰箱，过夜后将冻存管转移到液氮保存。
4.注意事项
4.1建议收到细胞后先用我们配套的培养基和血清。收到活细胞的客户培养瓶中的培养基可回收使用，保存在4度可使用一周。
4.2不同实验室操作上会有些许差异，为了避免细胞不适应，请先按照说明书推荐的方法和操作步骤培养，待细胞冻存后可根据自己的习惯操作看细胞是否能够适应。
4.3建议收到细胞后，前几代及时冻存一些细胞，并最好是可以多冻存几个批次。
HFF-1人皮肤成纤维细胞
