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上海语纯生物科技有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 货号 | CC96119 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号：CC96119
产品规格：10 ×100ul/100×100ul
本产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。
产品介绍
Rosetta-gamim B (DE3)pLacl 感受态
产品简介
Rosetta-gami B 系列菌株来源于 Origami B 系列菌株，是集合了 BL21 系列、Rosetta 系列和 Origami
系列菌株的优点。菌株含有 pLacIRARE 质粒，能够提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有的 AUA, AGG,
AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六个稀有密码子的 tRNA，提高了真核细胞蛋白在大肠杆菌中的表达水
平。在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase (gor)基因上同时含有突变，这使得该菌株
能够更加高效地在细胞质内生成二硫键，有助于表达含二硫键的活性蛋白。菌株带有氯霉素、卡
那和四环素抗性，无法用于转化含这些抗性的质粒。Rosetta-gami B(DE3)系列菌株含有溶源的
λDE3，可以表达 T7 RNA 聚合酶，适用于 pET 系列载体及其他 T7 启动子系列载体。此外，
pLacIRARE 质粒能够额外表达 lac 转录抑制蛋白，从而抑制了 lac 启动子的本底表达水平。
pLacIRARE 质粒的起始复制位点是 p15 Origin, 这使得该质粒能够和 pUC-及 pBR322-衍生的质粒互
相共存。经 pUC18 质粒转化检测，Rosetta-gami B(DE3)感受态细胞的转化效率可达 107 cfu/μg DNA
以上。
产品组成
组分
Rosetta-gami B (DE3) pLacI
化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB pLacIRARE (CamR, KanR, TetR)
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
除 pLacIRARE 质粒外，无外源质粒 DNA 残留；
化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
Rosetta-gamim B (DE3)pLacl 感受态
