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上海语纯生物科技有限公司
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产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 货号 | CC96177 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号：CC96177
产品规格：10 ×100ul/100×100ul
本产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。
产品介绍
EPI400 感受态
产品简介
EPI400 来源于 EC100 菌株，将 EC100 核基因中控制质粒拷贝数的 pcnB 基因改造成诱导型启动子驱
动后获得了 EPI400 菌株。EPI400 菌株可以显著降低大部分质粒的拷贝数，特别适合于各种含不稳
定 DNA 的质粒或含有毒性基因的克隆；在加入 CopyMore 400 诱导剂后可将质粒的拷贝数提高至正
常状态。mcrA 突变和 mrr-hsdRMS-mcrBC 缺失的基因型使得 EPI400 菌株适合于克隆富含甲基胞嘧
啶或甲基腺嘌呤的 DNA 。recA1和 endA1突变有利于插入 DNA的稳定和高纯度质粒 DNA的提取。
lacZΔM15 标记的存在使 EPI400 可用于蓝白斑筛选，tonA 突变赋予其抗噬菌体 T1 和 T5 的能力，
rpsL 突变赋予其链霉素抗性。经 pUC18 质粒转化检测，EPI400 感受态细胞的转化效率可达 107
cfu/μg DNA。
产品组成
组分
EPI 化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL
(StrR) nupG trfA tonA pcnB dhfr
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留
化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
EPI400 感受态
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