联系电话
产品简介
供货周期 | 现货 | 规格 | 10 ×100ul/100×100ul |
---|---|---|---|
货号 | CC96133 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号:CC96133
产品规格:10 ×100ul/100×100ul
本产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。
产品介绍
Stbl2感受态
产品简介
Stbl2 菌株来源于大肠杆菌 JM109 菌株,适合于克隆含不稳定序列(如正向重复序列、反向重复序
列、逆转录病毒的序列等)。另外,mcrA基因的突变和 mcrBC-hsdRMS-mrr基因缺失使得该菌株更
适于克隆甲基化的基因组序列;同时 Stbl2 也可用于慢病毒载体的构建。该菌株中 recA1 和 endA1
的突变有利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。Stbl2 感受态细胞的平板生长最好条件
是 30 ℃。Stbl2 感受态细胞中包含有 α 互补序列的质粒,所以本宿主菌株不能被用于蓝白斑筛选实
验;本菌株也不耐受 ccdB 毒性。经 pUC18 转化检测,Stbl2 感受态细胞的效率可达 107 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
Stbl2 化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:FendA1 glnV44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 Δ(lac-proAB) mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr) λ-
存储条件
-80 ℃保存;请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
产品特性
-属于大肠杆菌 K 株系列,主要用于目标基因的克隆和质粒的保存;不可用于以 T7 RNA 聚合酶为
表达系统的蛋白表达;
-该菌株适合克隆不稳定插入片段,甲基化的基因组序列,以及慢病毒载体的构建。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留;
化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中,轻轻弹匀,冰上孵育 30 min;
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中,不要晃动,热激 90 s 后,立刻置于冰浴中静置 2-3 min;
4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基(室温或37 ℃预热),然后置于37 ℃摇床复壮45 min;
5. 取不同体积的转化产物,用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上,于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用;
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10;
3. 加入待转化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受态细胞,仅用手指轻弹即可;
4. 为确保最高转化效率,整个操作过程中除热激外均要保持低温,并且要尽量轻柔。
Stbl2感受态