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上海语纯生物科技有限公司
初级会员·1年
具体成交价以合同协议为准
产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 5×10^5 |
|---|---|---|---|
| 货号 | EM0177 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号：EM0177
产品规格：5×10^5
本产品仅供科学研究或进一步生产使用，不可用于临床诊断或治疗。
产品介绍
小鼠表皮成纤维细胞
小鼠表皮成纤维细胞分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介：
分离的小鼠表皮成纤维细胞采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测：
分离的小鼠表皮成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
传代特性 | 可传3-5代 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% |
细胞培养状态 发货时发送细胞电子版照片
使用方法： 小鼠表皮成纤维细胞是一种贴壁细胞，细胞形态程成纤维细胞样，在我们标准操作流程下，细胞可传3-5代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。 客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度 的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
贴壁细胞传代
吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养 瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变 圆后，再加入5ml培养基终止消化；
用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的培养基至5m L，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
待细胞贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。
细胞实验 因原代细胞贴壁特殊性，原代细胞在消化后转移至其他实验器皿 (如玻璃爬片、培养 板、共聚焦培养皿等)时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没 贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2 )，多聚懒氨酸PLL(0.1mg/ml)， 明胶(0.1%)， 依据细胞种类而定 。 四、注意事项
培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我们沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽 告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
该细胞只可用于科研。 备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考
小鼠表皮成纤维细胞
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