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上海语纯生物科技有限公司
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具体成交价以合同协议为准
产品简介
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 1×10^6 |
|---|---|---|---|
| 货号 | BH3525 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药/生物制药 |
产品货号：BH3525
产品规格：1×10^6
细胞鉴定STR鉴定已通过
细胞来源国外
细胞背景建立于年龄未知的女性丙肝患者。来源于单一供体。
细胞特性 形态：上皮样,贴壁生长。 用途：仅供科研使用。
产品介绍
HepaRG 人肝癌细胞
细胞鉴定STR鉴定已通过
细胞来源国外
细胞背景建立于年龄未知的女性丙肝患者。来源于单一供体。
细胞特性 形态：上皮样,贴壁生长。 用途：仅供科研使用。
培养条件1）准备William's E+ FBS 10%+2mM 谷氨酰胺+5.25ug/ml 胰岛素+50uM 氢化可的松+P/S 1%
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
注意事项
1.培养密度不要超过80%，密度过高时细胞可能自发分化。
2.包被试剂对这个细胞影响不是特别大。如果用包被试剂会更好，不用的话，贴壁弱一些，但不会影响细胞的状态，包被试剂包被培养皿让细胞更好贴壁，推荐使用：Applied Cell Extracellular Matrix (G422)
3.若使用包被试剂，这个细胞消化时间比较长，放在培养箱里消化是 4-6min左右（细胞消化时间与所用胰酶效价、消化时候细胞密度、细胞贴壁强弱以及温度等因素有关，建议第一次消化时候，多在显微镜下观察，以找到优良消化时间）。
HepaRG 人肝癌细胞贴壁细胞参考：
一. 收货后消毒静置待细胞全部稳定后拍照。弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
二. T25瓶加入0.25％EDTA胰蛋白酶1-2ml于培养瓶中震荡混匀，如果属于贴壁不牢固的细胞很容易脱落的就培养箱外面消化震荡等脱落90%以上终止消化，一般小于1分钟以内，甚至不加胰酶有部分贴壁非常不牢固的细胞也会自然震荡脱落。如果是贴壁牢固的细胞则置于37℃培养箱中消化提高效率，每40-50秒拿出培养箱震荡帮助细胞脱落，如果脱落90%以上则对应3-6ml含有10%血清的培养基终止结束，以防胰酶残留。如果贴壁非常牢固的细胞，脱落的比例比较低，也不超过2分钟后终止消化结束，再加入1ml培养基让细胞缓冲后再过2分钟进行二次消化，反复分步消化以降低单次消化时长，减少刺激，保护细胞膜。或采用刮产刮细胞的方式处理也可以。总归原则是达到消化目的的同时减少细胞膜受到的损伤越小越好。
三.消化完成后轻轻吹匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶/6cm培养皿中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。期间多的细胞一定保存多份细胞冻存管备种。
运输形式常温发货：收到后T25瓶消毒再放置培养箱静置2-6小时后观察密度和状态并拍照2-3张反馈给销售，密度达标就可以传代。前期传代比例1:2，等再次长满后传代时建议冻存其中一整瓶成1个1ml冻存管，另外一瓶继续传代，反复冻存足量种子后才扩增做实验，以防突发情况引起断种。
干冰发货：常规细胞发货冻存管2只，复苏1只，另外一只备用，第一个复苏不成功时严格按照厂家要求复苏第二个，均没有复苏成功的情况及时留存复苏照片通知销售处理售后问题。
生物安全1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。
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