Na+k+—ATP酶活性检测试剂盒 抗逆 返回列表页

NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶活性检测试剂盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

产品货号：BC8843

产品名称：Na+k+——ATP酶活性检测试剂盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

产品规格：100T/48S

Na+k+—ATP酶活性检测试剂盒 抗逆产品简介：

中文名称：Na+k+ ——ATP酶活性检测试剂盒

英文名称：Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

别名：Na+k+――ATP酶试剂盒 Na+k+ ――ATP酶测试盒

规格：100T/48S

检测方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

储存条件：Store at -20℃，6 months

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准

NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶活性检测试剂盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit

Na+K+- ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP水解生成ADP和无机磷。

Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

1、细菌、细胞或组织样本的制备：

细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清;按照每500万细菌或细胞加入1mL试剂一，超声波破碎细菌或细胞(功率200w，超声3s，间隔10s，重复30次)：8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

组织：称取约0.1g组织，加入1mL试剂一进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、血清(浆)样本：直接检测。

二、测定步骤

1、可见分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至660nm，可见分光光度计需用蒸馏水调零。

三、Na+K+-ATP酶活计算

1、血清(浆)Na*K*-ATPase活力的计算：

larbio

定义：规定每小时每毫升血清(浆)中Na+K+- ATP酶分解ATP产生lμmoL无机磷的量为一个酶活力单位。

Na+K+-ATP酶活力(U/mL)=C标x(A测定-A对照)+(A标准-A空白)xV 总+V 样+TxF=7.5x(A测定-A对照)+(A标准-A空白)xF

2、组织、细菌或细胞中Na*K*-ATPase活力的计算：

(1)按蛋白浓度计算：

定义：规定每小时每毫克组织蛋白中Na+K+-ATP酶分解ATP产生lμmoL无机磷的量为一个酶活力单位。

Na+K+-ATP酶活力(U/mg prot)=C标x(A测定-A对照)÷(A标准-A空白) xV总÷ (CprxV样) ÷TxF=7.5x(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)+CprxF

(2)按样本质量计算：

定义：规定每小时每克组织中Na+K+-ATP酶分解 ATP产生lμmoL无机磷的量为一个酶活力单位。

Na+K+-ATP酶活力(U/g质量)=C标x(A 测定-A对照)+(A标准-A空白)xV总+(V样+V 样总xW)÷TxF-7.5x(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)÷WxF

(3)按细菌或细胞数量计算：

定义：规定每小时每1万个细菌或细胞中Na+K+-ATP酶分解ATP产生lμmoL无机磷的量为一个酶活力单位。

Na+K+-ATP酶活力(U/104cell)=C标x(A测定-A对照)÷(A标准-A空白)xV 总÷(V 样÷V 样总xN)÷TxF=7.5x(A测定-A对照)+(A标准-A空白)xF

C标：标准管浓度，0.5μmol/mL：V总：酶促反应总体积，0.25mL;V样：加入样本体积，0.1mL：V样总：加入试剂一体积，1mL;T：反应时间，1/6小时：Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL：W：样本质量，g;N：细菌或细胞总数，以万计：F：样本稀释倍数。

注意事项：

1、由于每一个样都必须做对照，本试剂盒100管保证测48份Na*K*-ATP酶。

2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。

Na+k+—ATP酶活性检测试剂盒 抗逆产品订购信息：

BC8843 Na+k+——ATP酶活性检测试剂盒 Na+K+——ATPase Activity Assay Kit 100T/48S