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猪delta冠状病毒N蛋白,猪德尔塔冠状病毒蛋白(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)原核表达

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更新时间:2024-12-19 15:37:03浏览次数:140次

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猪delta冠状病毒N蛋白,猪德尔塔冠状病毒蛋白(Porcinedeltacoronavirus,PDCoV)猪delta冠状病毒N蛋白二类传染病,是一种新型猪肠道冠状病毒,可引起5-15日龄哺乳仔猪腹泻和呕吐,迅速脱水,衰竭而亡,发病率和死亡率高达50%-99%,生长猪、成年猪及生产母猪发病轻微,可不治而愈

    猪delta冠状病毒N蛋白,猪德尔塔冠状病毒蛋白(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)

    猪delta冠状病毒N蛋白二类传染病,是一种新型猪肠道冠状病毒,可引起5-15日龄哺乳仔猪腹泻和呕吐,迅速脱水,衰竭而亡,发病率和死亡率高达50%-99%,生长猪、成年猪及生产母猪发病轻微,可不治而愈。

    猪delta冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus, PDCoV)作为近年来新发现的一种猪肠道冠状病毒,其研究日益受到重视。该病毒主要引起仔猪的呕吐、脱水和水样腹泻,对养猪业构成了重大威胁。在众多PDCoV的结构蛋白中,N蛋白(Nucleocapsid Protein)因其相对保守性和良好的免疫原性,成为了研究热点之一。本文将深入探讨PDCoV N蛋白的特性、表达、功能及其在诊断与防控中的应用。

    PDCoV N蛋白的特性
    PDCoV的N蛋白是病毒核衣壳的重要组成部分,它不仅在病毒复制过程中发挥关键作用,还是诱导宿主产生免疫反应的重要靶标。N蛋白在不同毒株间表现出高度的保守性,这意味着基于N蛋白的检测方法具有广泛的适用性。此外,N蛋白在感染细胞内含量丰富,易于检测和纯化,为相关研究提供了便利。

    N蛋白的表达与纯化
    为了深入研究PDCoV N蛋白,科研人员通常采用基因工程技术进行N蛋白的表达与纯化。例如,通过RT-PCR扩增PDCoV N基因,并克隆至原核表达载体(如pColdI)中,在大肠杆菌中诱导表达。在低温(如16℃)条件下,通过IPTG诱导,可以获得大量可溶性的重组N蛋白。随后,利用SDS-PAGE电泳和Western blot等方法对表达产物进行鉴定和纯化,确保获得高纯度的N蛋白用于后续研究。

    N蛋白的免疫原性
    PDCoV N蛋白具有良好的免疫原性,能够刺激宿主产生特异性抗体。这些抗体在病毒感染的诊断中具有重要意义。通过免疫小鼠等实验动物,可以获得针对PDCoV N蛋白的单克隆抗体(mAb)。这些单克隆抗体不仅具有高特异性和高灵敏度,还能够用于建立快速、准确的诊断方法,如ELISA和IFA等。
    基于N蛋白的诊断方法
    基于PDCoV N蛋白的诊断方法主要包括血清学检测和分子生物学检测两大类。血清学检测主要利用N蛋白特异性抗体检测感染动物血清中的病毒抗体,如ELISA和免疫荧光抗体试验(IFA)。这些方法具有操作简便、结果直观等优点,广泛应用于PDCoV的流行病学调查和疫情监测。分子生物学检测则主要通过检测病毒核酸(如RNA)来进行诊断,如RT-PCR和实时荧光定量PCR(qPCR)等。这些方法具有高度的特异性和敏感性,能够早期发现病毒感染,为疫情防控提供重要依据。
    N蛋白在疫苗研发中的潜力
    鉴于PDCoV N蛋白的免疫原性和保守性,它在疫苗研发中展现出巨大的潜力。通过构建基于N蛋白的亚单位疫苗或基因工程疫苗,可以诱导宿主产生特异性免疫反应,从而有效预防PDCoV感染。此外,N蛋白还可以作为诊断试剂的靶标,用于评估疫苗免疫效果和监测疫苗接种后的抗体水平。

    表达载体: 杆状病毒载体 
    蛋白纯度: 大于95%(SDS-PAGE电泳)
    品牌:PhyCell/费雪
    规格:0.1mg,0.5mg,1mg
    该抗原可应用于ELISA、胶体金、免疫亲和柱层析等免疫检测。
    蛋白载体:牛血清白蛋白/卵清白蛋白/匙孔血蓝蛋白BSA/OVA/KLH
    物理性状:液体,避免反复冻融
    来 源:Balb/c 小鼠
    免疫层析效价: 1:40以上,偶联比大于1:60
    蛋白浓度:>1mg/ml,具体视批次而定
    缓冲液:0.01M PBS PH7.4无防腐剂
    储存条件:-20℃以下
    稳 定 性: 冻融一次复检合格,有效期三年
    本产品仅供研究使用,不适用于人类、治疗或诊断应用。

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