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赛默飞 Countess 3 FL自动细胞计数仪使用教程

2025-1-24  阅读(178)

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赛默飞 Countess 3 FL 自动细胞计数仪 是一款高精度、自动化的细胞计数和分析工具,结合了荧光显微镜技术和先进的图像分析功能。以下是使用 Countess 3 FL 自动细胞计数仪的详细教程,帮助用户快速上手并有效利用仪器进行细胞分析。

1. 开始前准备

在使用Countess 3 FL之前,确保仪器和样本准备好。

1.1 仪器准备

  1. 接通电源:确保仪器连接电源,并开启电源按钮。

  2. 检查仪器状态:在仪器启动后,等待系统自检完成。此时屏幕上会显示仪器的欢迎界面,确认没有错误提示。

  3. 清洁样本腔和显微镜镜头:使用适当的清洁工具(如无尘布和清洁液)清洁仪器的显微镜镜头和样本腔,避免灰尘影响结果。

1.2 样本准备

  1. 准备细胞悬液:确保细胞悬液均匀,必要时使用离心机沉淀细胞,去除上清液。

  2. 选择适当的染料:根据需要使用台盼蓝或荧光染料(如Calcein-AM、PI等),将染料加入细胞悬液中,帮助区分活细胞与死细胞。

2. 操作步骤

2.1 启动仪器

  1. 打开 Countess 3 FL,并触摸屏幕上的 "Start" 按钮进入主菜单。

  2. 在主菜单中,选择适合你实验的计数模式(如台盼蓝染色、荧光染料分析等)。

2.2 样本加载

  1. 将准备好的细胞悬液轻轻滴入计数板或样品腔。确保液体的表面平整,避免气泡干扰。

  2. 使用Countess 3 FL的专用样品腔盖住样品,确保没有气泡。插入样品腔到仪器的扫描区域。

2.3 设置计数参数

  1. 选择适合的实验模式:

    • 普通细胞计数模式:选择“台盼蓝"或其他染料检测活死细胞的模式。

    • 荧光染料模式:如果使用了荧光染料(如Calcein-AM、PI等),选择相应的荧光通道(如绿色或红色),以便通过荧光信号分析细胞活性。

  2. 调整其他实验设置(如增益、曝光时间等),以确保荧光信号清晰可见,细胞图像清晰。

2.4 运行计数

  1. 按下 “Start Counting" 按钮,仪器将自动开始图像采集与分析。Countess 3 FL会扫描样品中的细胞图像,并进行自动识别和计数。

  2. 在分析过程中,Countess 3 FL会自动显示细胞数量、活细胞和死细胞的比例、细胞大小分布等数据。

2.5 查看分析结果

  1. 分析完成后,仪器会自动生成详细的结果报告,并显示在触摸屏上。

  2. 查看报告:报告包括细胞总数、活细胞数、死细胞数、活细胞比例等。你还可以查看细胞的大小分布、形态等详细信息。

  3. 调整报告设置:根据需要,您可以选择导出数据或调整报告设置。

2.6 导出数据

  1. 点击“Export"按钮,将实验数据导出为 CSV 格式文件。

  2. 通过USB或网络将文件转移到电脑上,以进行进一步分析。

3. 高级功能与设置

3.1 多通道荧光染料分析

如果您正在使用多个荧光染料(如Calcein-AM、PI、Hoechst等),可以选择适当的荧光通道进行细胞分析:

  1. 在设置中选择“Fluorescent Mode"并每个通道的染料类型。

  2. 仪器会自动切换不同的荧光通道,识别不同的细胞群体(例如,活细胞、死细胞、细胞核等)。

3.2 细胞大小和形态分析

通过细胞大小和形态分析功能,您可以评估细胞的健康状况和群体分布:

  1. 选择“Size Distribution"模式,仪器会根据细胞大小对样本进行分类,并生成直方图。

  2. 进一步分析细胞的形态特征,观察细胞是否有异常形态(如细胞碎片等)。

4. 维护与保养

4.1 清洁

定期清洁Countess 3 FL仪器,特别是显微镜镜头和样品腔:

  1. 用无尘布清洁显微镜镜头,避免灰尘和污渍影响图像质量。

  2. 清洁样品腔,确保没有残留的样品或染料,避免交叉污染。

4.2 校准

Countess 3 FL具有自动校准功能,但建议定期进行校准检查,确保仪器的计数结果准确:

  1. 使用标准细胞悬液进行校准,检查仪器计数的准确性。

  2. 根据仪器使用频率,建议每隔一段时间重新校准。

4.3 软件更新

定期检查并更新仪器的操作系统和分析软件:

  1. 根据赛默飞公司发布的软件更新通知,下载并安装最新的软件版本,确保仪器的功能和性能得到优化。

5. 常见问题解答

5.1 仪器无法启动

  • 确保电源插头连接正确,电源开关已打开。

  • 检查电源指示灯是否亮起,确保电源正常。

5.2 样本图像模糊

  • 检查显微镜镜头是否干净,如有灰尘,使用无尘布轻轻擦拭。

  • 检查样品腔,确保没有气泡,并确保样本液面平整。

5.3 计数结果与预期差异

  • 检查染料的使用是否正确,确保染料与细胞的匹配。

  • 确保选择了正确的计数模式,并且设置了合适的参数(如荧光增益、曝光时间等)。

  • 确保样品均匀,并且细胞浓度在适合仪器测量的范围内。

总结

赛默飞Countess 3 FL自动细胞计数仪通过自动化操作、荧光显微技术、智能图像分析,提供高效、精确的细胞计数和分析功能。通过本文提供的步骤,您可以快速上手并有效利用Countess 3 FL进行细胞研究。定期维护、更新和适当的设置调整,能够确保仪器长期稳定地为您提供精准的实验结果。

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