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杭州实了个验生物科技有限公司
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移液器的校准方法和步骤
2024-8-3 阅读(244)
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浏览次数校准移液器是确保实验结果准确性的重要步骤。以下是详细的移液器校准方法和步骤：
一、校准前准备
工具和材料
精密天平（精度至少为0.01 mg）
蒸馏水或去离子水
量筒（用于测量蒸馏水）
校准砝码（用于校准天平）
移液器吸头（与移液器匹配的高质量吸头）
温度计（测量水温）
湿度计（测量环境湿度）
手套和防护装备（确保操作无污染）
环境要求
环境温度：20°C ± 2°C
环境湿度：50% ± 10%
避免气流、震动和电磁干扰
二、校准步骤
1. 校准前的准备
确保移液器清洁且干燥。
检查移液器是否需要维护或更换密封圈。
在开始校准前至少30分钟，将所有工具和材料放置在实验室环境中，使其达到环境平衡。
2. 天平校准
打开天平，进行预热（根据天平说明书的要求）。
使用校准砝码进行天平校准，确保天平读数准确。
确认天平校准完毕后，将天平调零。
3. 准备蒸馏水
测量并记录水温（理想温度为20°C）。
根据温度，查找水的密度（参考密度表）。
4. 吸取和称量
设置移液器至校准所需的体积（如10µL、100µL、1000µL）。
选择适配的吸头，安装到移液器上。
使用正确的移液技术吸取水样：
将吸头浸入水中2-3毫米。
缓慢平稳地吸取水样。
等待1-2秒，确保吸头内液体稳定。
将吸头移到天平上方。
缓慢释放移液器按钮，将水样排到天平的称量盘上。
记录天平读数（质量）。
5. 重复操作
对每个体积进行至少10次重复操作，记录每次称量的质量。
6. 计算体积
使用以下公式计算每次称量的体积：其中， 是体积（µL）， 是质量（mg）， 是水的密度（mg/µL，取决于水温）。
7. 计算误差
计算每次测量的平均体积（）。
计算标准偏差（SD）：其中， 是每次测量的体积， 是测量次数。
计算相对标准偏差（RSD）：
计算系统误差（系统误差 = 平均体积 - 设定体积）。
三、评估结果
精度和准确度
比较计算出的平均体积和设定体积的差异（系统误差）。
检查相对标准偏差（RSD），确保在移液器规定的允许范围内。
调整移液器
如果误差超出允许范围，根据移液器说明书进行调整（通常通过移液器上的调节螺钉）。
调整后重新进行校准，直至误差在允许范围内。
记录和报告
填写移液器校准记录表，包括每次测量的体积、平均体积、标准偏差和相对标准偏差。
保存校准记录，以备将来审查。
四、后续维护
定期校准
根据使用频率和实验要求，定期校准移液器（通常每3-6个月一次）。
日常维护
每次使用后清洁移液器，特别是在处理高风险样本后。
避免粗暴操作，正确存放移液器。
润滑和维护
定期使用适当的润滑剂对内部机械部件进行润滑，确保其灵活操作。
检查并更换磨损的密封圈和活塞。
五、常见问题及解决方法
漏液
可能原因：吸头安装不正确、密封圈老化或移液器内部部件损坏。
解决方法：确保吸头正确安装，定期检查和更换密封圈，必要时维修或更换内部部件。
量程不准
可能原因：移液器需要校准、操作方法不正确或移液器内部污染。
解决方法：重新校准移液器，确保正确操作，定期清洁移液器内部。
吸液不均匀
可能原因：吸头问题、移液器污染或操作不当导致气泡。
解决方法：更换吸头，清洁移液器，吸液时缓慢平稳操作。
按钮卡顿
可能原因：按钮或内部部件磨损、污染或缺乏润滑。
解决方法：检查并更换磨损部件，定期清洁和润滑移液器。
吸液或排液困难
可能原因：活塞或密封圈损坏、内部堵塞。
解决方法：检查并更换损坏的活塞或密封圈，清洁移液器内部。
通过上述步骤，可以确保移液器的精度和准确性，从而保证实验结果的可靠性。如果在校准过程中遇到复杂或无法解决的问题，建议联系厂家或专业技术人员进行维护和维修。
