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手把手教你校准移液器!

2024-8-3  阅读(202)

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校准移液器是确保实验结果准确性的关键步骤。以下是手把手教你校准移液器的详细步骤:

一、准备工作

  1. 工具和材料

    • 精密天平(精度至少为0.01 mg)

    • 蒸馏水或去离子水

    • 量筒(用于测量蒸馏水)

    • 校准砝码(用于校准天平)

    • 移液器吸头(与移液器匹配的高质量吸头)

    • 移液器校准记录表

    • 温度计(测量水温)

    • 湿度计(测量环境湿度)

    • 手套和防护装备(确保操作无污染)

  2. 环境要求

    • 环境温度:20°C ± 2°C

    • 环境湿度:50% ± 10%

    • 避免气流、震动和电磁干扰

二、校准步骤

  1. 校准前的准备

    • 确保移液器清洁且干燥。

    • 检查移液器是否需要维护或更换密封圈。

    • 在开始校准前至少30分钟,将所有工具和材料放置在实验室环境中,使其达到环境平衡。

  2. 天平校准

    • 打开天平,进行预热(根据天平说明书的要求)。

    • 使用校准砝码进行天平校准,确保天平读数准确。

    • 确认天平校准完毕后,将天平调零。

  3. 准备蒸馏水

    • 测量并记录水温(理想温度为20°C)。

    • 根据温度,查找水的密度(参考密度表)。

  4. 吸取和称量

    • 将吸头浸入水中2-3毫米。

    • 缓慢平稳地吸取水样。

    • 等待1-2秒,确保吸头内液体稳定。

    • 将吸头移到天平上方。

    • 缓慢释放移液器按钮,将水样排到天平的称量盘上。

    • 设置移液器至校准所需的体积(如10µL、100µL、1000µL)。

    • 选择适配的吸头,安装到移液器上。

    • 使用正确的移液技术吸取水样:

    • 记录天平读数(质量)。

  5. 重复操作

    • 对每个体积进行至少10次重复操作,记录每次称量的质量。

  6. 计算体积

    • 使用以下公式计算每次称量的体积:V=mρV = \frac{m}{\rho}其中,VV 是体积(µL),mm 是质量(mg),ρ\rho 是水的密度(mg/µL,取决于水温)。

  7. 计算误差

    • 计算每次测量的平均体积(Vˉ\bar{V})。

    • 计算标准偏差(SD):SD=(ViVˉ)2n1SD = \sqrt{\frac{\sum (V_i - \bar{V})^2}{n-1}}其中,ViV_i 是每次测量的体积,nn 是测量次数。

    • 计算相对标准偏差(RSD):RSD=SDVˉ×100%RSD = \frac{SD}{\bar{V}} \times 100\%

    • 计算系统误差(系统误差 = 平均体积 - 设定体积)。

三、评估结果

  1. 精度和准确度

    • 比较计算出的平均体积和设定体积的差异(系统误差)。

    • 检查相对标准偏差(RSD),确保在移液器规定的允许范围内。

  2. 调整移液器

    • 如果误差超出允许范围,根据移液器说明书进行调整(通常通过移液器上的调节螺钉)。

    • 调整后重新进行校准,直至误差在允许范围内。

  3. 记录和报告

    • 填写移液器校准记录表,包括每次测量的体积、平均体积、标准偏差和相对标准偏差。

    • 保存校准记录,以备将来审查。

四、后续维护

  1. 定期校准

    • 根据使用频率和实验要求,定期校准移液器(通常每3-6个月一次)。

  2. 日常维护

    • 每次使用后清洁移液器,特别是在处理高风险样本后。

    • 避免粗暴操作,正确存放移液器。

通过上述步骤,可以确保移液器的精度和准确性,从而保证实验结果的可靠性。如果在校准过程中遇到复杂或无法解决的问题,建议联系厂家或专业技术人员进行维护和维修。


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