细胞名称：大细胞肺癌LCLC97TM1ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：

取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜*培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀细胞用12ml*培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，zui后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）待细胞*贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。

4、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含5ml*培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀用5ml*培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）第二天，换用新鲜*培养基继续培养。

原代细胞与细胞系有什么区别？细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，*次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞zui大的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的*性。细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上，连续细胞系可以用大量次培养基培养，随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。

1、倍增和代数有什么区别？倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。

2、接收到的冻存细胞该如何处理？收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。

3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养？推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作，如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室，我们会为你提供帮助。请的细胞培养专家。

售后服务告知书

1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；

3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；

5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

二）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

1. 客户造成细胞污染，不重发；

2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；

6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；

7. 视具体情况而定。

YS4629C人非小细胞肺癌细胞NCI-H358

YS4630C人结直肠腺癌细胞NCI-H716

YS4631C卵巢癌细胞RMGI

YS4632C多发性骨髓瘤MOLP8

YS4633C白血病细胞JJN3

YS4634C结肠癌细胞CL11

YS4635C结肠癌细胞CL-40

YS4636C人肺癌细胞NCI-H1755

YS4637C人肾上腺皮质小细胞癌细胞SW-13

YS4638C人大肠癌细胞CX-1

YS4639C 骨肉瘤细胞MNNGHOSCl #5

YS4640C人甲状腺癌细胞C643

YS4641C小鼠肾小球系膜细胞SV40-MES-13

YS4642C宫颈腺癌细胞HeLa229

YS4643C畸胎瘤细胞NCCIT

YS4644C大鼠骨肉瘤细胞UMR-106

YS4645C人肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1

YS4646C肺支气管良性肿瘤NCI-H727

YS4647C人小细胞株肺癌细胞 NCI-H82

YS4648C人神经母细胞瘤细胞IMR-32

YS4649C口腔鳞状肿瘤细胞HSC2

YS4650C乳腺癌细胞BT549

YS4651C小鼠垂体瘤细胞AtT-20

YS4652C大鼠垂体瘤细胞GH3

YS4653C大鼠神经胶质瘤细胞C6

YS4654C小鼠杂交瘤（抗CD2）细胞OKT 11

YS4655C大鼠骨骼肌成肌细胞L6

YS4656C人胃癌细胞HS746T

YS4657C小鼠胚胎肝细胞BNL CL.2

YS4658C人结肠腺癌细胞SW948

YS4659C人burkitt淋巴瘤细胞CA46

YS4660C人肺腺癌细胞Calu-1

YS4661C人T淋巴细胞瘤细胞Jurkat

YS4662C人膀胱移行细胞癌SW780

YS4663C小鼠肾腺癌细胞RenCa

YS4664C 小鼠胶质母细胞瘤细胞荧光标记GL261-Red-Fluc

YS4665C人多形性肝癌细胞SNU-387

YS4666C人肝癌细胞SNU-182

YS4667C骨髓瘤细胞KMS11

YS4668CB细胞淋巴瘤WILL-1

YS4669C人T淋巴细胞白血病细胞HuT78

YS4670CFreeStyle 293-FFreeStyle 293-F

YS4671C恒河猴胚肾细胞FRhK4

YS4672C非洲绿猴正常肾细胞Vero

YS4673C非洲绿猴肾细胞CV1

YS4674C小鼠胚胎成纤维细胞BALB3T3 clone A31

YS4675C恒河猴肾细胞LLC-MK2

YS4676C非洲绿猴肾成纤维细胞COS1

YS4677C多发性骨髓瘤细胞MM.1R

YS4678C人结直肠腺癌上皮细胞SW837

YS4679C人肺腺癌细胞HARAB

YS4680CEBV阳性棉顶狨猴淋巴细胞B958

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