细胞名称：MDCK(NBL-2)马-达二氏犬肾细胞系ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：

取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜*培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀细胞用12ml*培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，zui后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）待细胞*贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。

4、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含5ml*培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀用5ml*培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）第二天，换用新鲜*培养基继续培养。

原代细胞与细胞系有什么区别？细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，*次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞zui大的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的*性。细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上，连续细胞系可以用大量次培养基培养，随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。

1、倍增和代数有什么区别？倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。

2、接收到的冻存细胞该如何处理？收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。

3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养？推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作，如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室，我们会为你提供帮助。请的细胞培养专家。

售后服务告知书

1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；

3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；

5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

二）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

1. 客户造成细胞污染，不重发；

2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；

6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；

7. 视具体情况而定。

YS3707CA375人黑色素瘤细胞株

YS3708C HTR-8人滋养细胞

YS3709C HDF-a人真皮成纤维母细胞-新生

YS3710C MCF/Adr人乳腺癌耐药细胞株

YS3711C Caki-1人肾透明细胞癌

YS3712C CAL-27人舌鳞状上皮细胞癌

YS3713C MDCK(NBL-2)马-达二氏犬肾细胞系

YS3714C HGC-27人胃癌细胞（未分化）HGC-27

YS3716C SGC7901/DDP人胃癌耐药株

YS3717C RL95-2人子宫内膜癌细胞RL95-2

YS3718C HCC94人子宫鳞癌细胞（高分化）

YS3719C SiHa人子宫颈鳞状细胞癌细胞

YS3720C C-33A人子宫颈癌

YS3721C PtK1(NBL-3)袋鼠肾细胞Pt

YS3722C 3LL小鼠肺癌细胞系

YS3723C C3H10小鼠间充质干细胞系

YS3724C YAC-1小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞)

YS3725C E.G7-OVAE.G7-OVA小鼠T淋巴瘤细胞（鸡OVA基因修饰）

YS3726C L1210小鼠淋巴细胞白血病

YS3727C G422小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株

YS3728C 小鼠浆细胞瘤；MPC-11小鼠浆细胞瘤

YS3731C Min6小鼠胰岛β细胞株

YS3732C PK15猪肾细胞系

YS3733C PK13猪肾细胞系

YS3734C GOTO人神经母细胞瘤细胞株

YS3735C NH-6人肾上腺神经母细胞瘤

YS3736C "SK-ES-1肉瘤（未分化骨肉瘤、尤文氏肉瘤）

"

YS3737C Hs706.T巨细胞肉瘤

YS3738C Hs737.T巨细胞肉瘤

YS3739C Hs821.T巨细胞肉瘤

YS3740C G-292,cloneA141B1人骨肉瘤细胞

YS3741C CCF-STTG1人脑星形胶质细胞瘤

YS3742C SW1088人脑星形胶质细胞瘤

YS3743C SW1783人脑星形胶质细胞瘤

YS3744C Becker人脑星形胶质细胞瘤

YS3745C NMC-G1人脑胶质细胞瘤

YS3746C D341Med人脑髓母细胞瘤细胞

YS3747C DBTRG-05MG人脑胶质母细胞瘤

YS3749C LN-229人脑髓母细胞瘤细胞

YS3750C U-138MG人脑胶质母细胞瘤

YS3751C AM-38人脑胶质母细胞瘤

YS3752C GB-1人脑胶质母细胞瘤

YS3753C KS-1人脑胶质母细胞瘤

YS3754C YH-13人脑胶质母细胞瘤

YS3755C CHP-212人脑神经母细胞瘤细胞

YS3756C SK-N-AS人脑神经母细胞瘤细胞

YS3757C HCC1806人乳腺鳞状细胞癌

YS3758C U-251MG人神经胶质细胞瘤细胞

YS3759C L-929小鼠结缔组织L细胞株929克隆

YS3760C EC-GI-10人食管鳞状细胞癌

YS3761C WERI-Rb-1人视网膜母细胞瘤

YS3762C A-704人肾癌细胞

YS3763C 769-P人肾癌细胞

YS3764C RS4;11人急性淋巴性白血病

YS3765C Reh人急性非B非T淋巴细胞性白血病细胞

YS3766C MV-4-11慢性骨髓单核细胞性白血病

YS3767C SUP-T1人淋巴母细胞淋巴瘤

YS3768C ARH-77人浆细胞白血病

YS3769C Loucy人淋巴细胞白血病

YS3770C RBL-2H3大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞

YS3771C C8166-CD4人T淋巴细胞白血病细胞

YS3772C COR-L88高加索人肺小细胞癌

YS3773C SW1573人肺泡细胞癌细胞

YS3774C KNS-62人肺支气管鳞状细胞癌

YS3775C GCT（纤维组织瘤细胞）肺转移灶

YS3776C "NCI-H2087人非小细胞肺腺癌细胞

YS3777C Mino人淋巴细胞瘤细胞

YS3778C BCP-1人B淋巴细胞瘤细胞

YS3779C Ramos-2G6-4C10人B淋巴细胞瘤细胞

YS3780C EB1人B淋巴细胞瘤细胞

YS3781C EB2人B淋巴细胞瘤细胞

YS3782C GA-10(Clone4)人B淋巴细胞瘤细胞

YS3783C P3HR-1人B淋巴细胞瘤细胞

YS3784C ST486人B淋巴细胞瘤细胞

YS3785C HH人皮肤T淋巴细胞瘤细胞

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