细胞名称：A704人肾癌细胞系ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：

取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜*培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀细胞用12ml*培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，zui后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）待细胞*贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入*培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。

4、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含5ml*培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀用5ml*培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）第二天，换用新鲜*培养基继续培养。

原代细胞与细胞系有什么区别？细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，*次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限，在有限的生命周期内需掌握好细胞zui大的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的*性。细胞系是不断生长，分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上，连续细胞系可以用大量次培养基培养，随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。

1、倍增和代数有什么区别？倍增是培养物中细胞总数加倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。

2、接收到的冻存细胞该如何处理？收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。

3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养？推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作，如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室，我们会为你提供帮助。请的细胞培养专家。

售后服务告知书

1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；

3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；

5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

二）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

1. 客户造成细胞污染，不重发；

2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；

6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；

7. 视具体情况而定。

YS3503CLM9小鼠HGPRT基因缺陷型骨肉瘤细胞

YS3504C Kasumi-1人急性原粒细胞白血病细胞

YS3505C WEHI164鼠纤维肉瘤细胞

YS3506C DMS153人小细胞肺癌

YS3507C Hi-fiveBTI-TN-5B1-4昆虫细胞

YS3508C HULEC-5a人肺微血管内皮细胞2018年ATCC新引进

YS3509C MARC-145[Marc-145;Marc145;Marc145]非洲绿猴胚胎肾细胞

YS3510C SCC-25[SCC25;SCC25]人舌磷癌细胞

YS3511C NCI-H2228[H2228;H-2228]人肺癌细胞

YS3512C MV-4-11人髓性单核细胞白血病细胞

YS3513C A549/Tax人肺腺癌耐药性细胞

YS3514C 143B人胸腺激酶缺陷细胞人骨肉瘤细胞

YS3515C 293T人肾上皮细胞

YS3516C 3T3-SWISS小鼠胚胎成纤维细胞

YS3517C 5-8F人高转移鼻咽癌细胞系

YS3518C 769-P-eGFP人肾细胞腺癌细胞稳转绿色荧光

YS3519C 786-O人肾透明细胞腺癌细胞

YS3520C 786-O人肾透明细胞癌细胞

YS3521C 786-O稳转mCherry+Luciferase人肾透明细胞腺癌细胞稳转红色荧光+luc

YS3522C 8505C人甲状腺未分化癌细胞系

YS3523C A172人脑胶质瘤细胞

YS3524C A20小鼠B细胞淋巴瘤细胞

YS3525C A2780/taxol人卵巢癌细胞耐药株

YS3526C A549/taxol人肺癌细胞耐药株

YS3527C A549-GFP人肺癌细胞带绿色荧光

YS3528C A704人肾癌细胞系

YS3529C ASMC小鼠气道平滑肌细胞

YS3530C AsPC-1（panc-1）人转移胰腺腺癌细胞

YS3531C AV3人乳头状瘤病毒相关性宫颈腺癌细胞

YS3532C "B16F10小鼠黑色素瘤细胞 "

YS3533C B95-8EBVEBV转化的绒猴白细胞

YS3534C BALB/C3T3小鼠胚胎成纤维细胞

YS3535C B-cpap人甲状腺乳头状癌细胞

YS3536C BE3人食管癌细胞

YS3537C "BEAS-2B人支气管上皮细胞 "

YS3538C BEL-100人肝癌细胞

YS3539C Bel7402/fu人肝癌细胞5-FU耐药株

YS3540C BGC823人胃癌细胞

YS3541C BON-1人胰腺神经内分泌瘤细胞

YS3542C C17.2小鼠神经干细胞系

YS3543C BV173人外周血B细胞

YS3544C caco-2人克隆结肠腺癌细胞

YS3545C calu-6(hlf)人退行性癌细胞

YS3546C case-17人宫颈腺癌细胞

YS3547C CCRF-CEM人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞

YS3548C CCRF-CEM（sup-b15）人急性淋巴细胞白血病细胞

YS3549C CCRF-SB人急性T淋巴细胞白血病细胞

YS3550C cgm1人EB病毒转化的B细胞

YS3551C ChangLiver（sk-n-sh）人HeLa[ChangLiver]细胞

YS3552C CHO-DHFR中国仓鼠卵巢细胞

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