细胞名称：ECV-304人脐静脉内皮细胞ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

培养步骤

a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的培养液收集至离心管中,留5ml培养基,放入37℃、5%CO2孵

箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,

1)对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%ydbm消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞

消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液

,补加1-2mL培养基重悬。

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的培养基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的细

胞培养箱中培养。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例

分到新的含8ml培养基的新瓶中。

方法二:可选择半换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基新瓶

中。

b、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml培养液终止消化,再轻

轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上

再转入液氮罐中。C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

注意事项：有些细胞比较特殊，如贴壁不牢，在运输过程中发生容易细胞脱落，这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入消化液1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂细胞培养箱中培养。

收到货后处理：

培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的 办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后

放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处

理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存( 40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售

后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的培养基,另外一瓶用自己配的培养基,以便进

行对比培养,换液拧松瓶盖),该细胞的STR鉴定可向客服咨询索取。

YS2448CHMSC-ad脂肪来源人MSC细胞人脂肪间充质干细胞

YS2449C CAL-62人甲状腺癌细胞

YS2450C HK-2人肾上皮细胞

YS2451C HTh-7人甲状腺癌细胞

YS2452C Hth83人甲状腺癌细胞

YS2453C KHM-5M人甲状腺癌细胞

YS2454C KMH-2人甲状腺癌细胞

YS2455C Ocut-2C人甲状腺癌细胞

YS2456C MDA-MB-436人乳腺腺癌细胞

YS2457C NIH:OVCAR-3人卵巢癌细胞

YS2458C MDA-MB-435S人黑素瘤细胞

YS2459C 人子宫内膜癌细胞AN3CA

YS2460C Daudi人Burkitts淋巴瘤细胞

YS2461C PC615.3[PC61;PC61.5.3]杂交瘤细胞CD25

YS2462C 人脐静脉内皮细胞huvec-c

YS2463C Bewo人胎盘绒膜癌细胞

YS2464C KYSE-150人食管鳞癌细胞

YS2465C HFF-1人皮肤成纤维细胞

YS2466C MCF10A人乳腺细胞

YS2467C ECV-304人脐静脉内皮细胞（人膀胱癌细胞污染）

YS2468C MIAPaCa-2人胰腺癌细胞

YS2469C HMEC-1人微血管内皮细胞

YS2470C MKN-45人胃癌细胞（不建议销售）

YS2471C A549/DDP人肺癌耐药株

YS2472C TCCSUP人膀胱癌细胞

YS2473C 人急性单核细胞白血病细胞MV4-11

YS2474C 人皮肤成纤维细胞BJ（不建议销售）

YS2475C 人肾癌细胞A498（不建议销售）

YS2476C 人小细胞肺癌细胞LTEP-sm（不建议销售）

YS2477C 人子宫内膜癌细胞ISK

YS2478C 人胆管上皮癌细胞

YS2479C 肾小球足细胞

YS2480C 人正常胰腺导管细胞

YS2481C 人甲状腺癌细胞

YS2482C 人小肠上皮细胞

YS2483C 人甲状腺癌细胞FRO

YS2484C 人胚胎干细胞H1无饲养层

YS2485C 人胚胎干细胞H9无饲养层

YS2486C 人胰腺癌细胞

YS2487C 人肺癌细胞

YS2488C 人肺癌细胞NCI-H1734

YS2489C 人肺癌细胞NCI-H2228

YS2490C 人肺癌细胞NCI-H2347

YS2491C 人大细胞肺癌细胞

YS2492C 人B淋巴细胞急性白血病细胞

YS2493C 人浅表性膀胱癌细胞

YS2494C 人脑多形性胶质母细胞瘤细胞

YS2495C 人T细胞性白血病细胞

YS2496C EBV-转化人淋巴细胞

YS2497C 小鼠神经细胞

YS2498C 人急性淋巴细胞白血病细胞

YS2499C 人胚心肌细胞

YS2500C 人红白血病细胞

YS2501C 人胚肺成纤维样细胞（男）

YS2502C 人胚肺成纤维细胞(女)

YS2503C 人胚皮肤成纤维细胞

YS2504C 人肺成纤维细胞

YS2505C 人皮肤成纤维细胞

YS2506C 人十二指肠腺癌细胞

YS2507C 人T淋巴细胞白血病细胞

YS2508C EBV-转化人淋巴细胞（彝族）

YS2509C 人非小细胞肺腺癌细胞

YS2510C 人小细胞肺癌细胞

YS2511C 人脑瘤细胞

YS2512C 人皮肤黑色素瘤细胞

YS2513C 人肺癌腺癌细胞

YS2514C 人甲状腺正常细胞

YS2515C 甲状腺乳头状癌细胞株

YS2516C 人T淋巴细胞白血病

YS2517C 人视网膜周细胞-

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