细胞名称：人原胚肾转化细胞系ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

培养步骤

a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的培养液收集至离心管中,留5ml培养基,放入37℃、5%CO2孵

箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,

1)对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%ydbm消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞

消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液

,补加1-2mL培养基重悬。

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的培养基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的细

胞培养箱中培养。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例

分到新的含8ml培养基的新瓶中。

方法二:可选择半换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基新瓶

中。

b、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml培养液终止消化,再轻

轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上

再转入液氮罐中。C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

注意事项：有些细胞比较特殊，如贴壁不牢，在运输过程中发生容易细胞脱落，这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入消化液1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂细胞培养箱中培养。

收到货后处理：

培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的 办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后

放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处

理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存( 40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售

后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的培养基,另外一瓶用自己配的培养基,以便进

行对比培养,换液拧松瓶盖),该细胞的STR鉴定可向客服咨询索取。

YS2390C人小肠癌细胞系

YS2391C SJCRH30人骨髓横纹肌肉癌细胞

YS2392C 人腺癌细胞系

YS2393C Hela细胞耐药亚株

YS2394C COC1细胞耐药亚株

YS2395C 人原胚肾转化细胞系

YS2396C 人胃癌细胞系

YS2397C 人胸腺激酶缺陷细胞系

YS2398C Burkitts淋巴瘤细胞系

YS2399C A-673人横纹肌肉瘤细胞

YS2400C 膀胱癌细胞

YS2401C 急性骨髓性白血病细胞

YS2402C SV－40转化肺成纤维细胞

YS2403C A2058人皮肤癌细胞

YS2404C 人乳腺癌细胞BcaP-37（暂不提供）

YS2405C 人脑神经胶质瘤细胞

YS2406C T-24人膀胱移行细胞癌细胞

YS2407C EB-3人淋巴样Burkitt淋巴瘤细胞

YS2408C L-CELLSL细胞

YS2409C 人肝癌细胞

YS2410C 表达HBV病毒的人肝细胞

YS2411C 人口腔癌细胞

YS2412C B淋巴细胞

YS2413C 人小细胞肺癌

YS2414C 人前列腺正常细胞

YS2415C 上颌牙龈癌颈淋巴结转移癌

YS2416C 宫颈癌细胞

YS2417C 人血液白血病细胞

YS2418C 急性淋巴细胞

YS2419C 人外周血淋巴细胞

YS2420C 胸膜积液B淋巴细胞

YS2421C 人舌鳞状细胞癌细胞

YS2422C 人骨肉瘤细胞

YS2423C 人乳腺癌细胞

YS2424C 人骨髓瘤细胞株

YS2425C 人外周淋巴细胞

YS2426C EB病毒感染的人外周淋巴细胞

YS2427C 人胚肺成纤维细胞

YS2428C 人肺腺癌细胞

YS2429C 人横纹肌肉瘤细胞

YS2430C 人黑色素瘤细胞

YS2431C 人肺鳞癌细胞

YS2432C 人B淋巴瘤细胞系

YS2433C 人前列腺癌细胞

YS2434C 人肺巨细胞癌高转移系

YS2435C 男性正常龟头细胞系

YS2436C HUMSC脐带血来源人MSC细胞人脐带血间充质干细胞

YS2437C H9人类胚胎干细胞

YS2438C 人子宫异位内膜上皮细胞细胞系

YS2439C BG01V人类胚胎干细胞

YS2440C DYR0100人诱导型多能干细胞

YS2441C DYP0530人诱导型多能干细胞

YS2442C TTA1人甲状腺癌细胞

YS2443C HFF人包皮成纤维细胞

YS2444C HN4人类胚胎干细胞

YS2445C B-CPAP人甲状腺癌细胞

YS2446C H1人类胚胎干细胞

YS2447C HMSC-bm骨髓来源人MSC细胞人骨髓血间充质干细胞

YS2448C HMSC-ad脂肪来源人MSC细胞人脂肪间充质干细胞

YS2449C CAL-62人甲状腺癌细胞

YS2450C HK-2人肾上皮细胞

YS2451C HTh-7人甲状腺癌细胞

YS2452C Hth83人甲状腺癌细胞

YS2453C KHM-5M人甲状腺癌细胞

YS2454C KMH-2人甲状腺癌细胞

YS2455C Ocut-2C人甲状腺癌细胞

YS2456C MDA-MB-436人乳腺腺癌细胞

YS2457C NIH:OVCAR-3人卵巢癌细胞

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