细胞名称：WiDr人结直肠癌细胞ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

培养步骤

a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的培养液收集至离心管中,留5ml培养基,放入37℃、5%CO2孵

箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,

1)对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%ydbm消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞

消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液

,补加1-2mL培养基重悬。

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的培养基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的细

胞培养箱中培养。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例

分到新的含8ml培养基的新瓶中。

方法二:可选择半换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基新瓶

中。

b、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml培养液终止消化,再轻

轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上

再转入液氮罐中。C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

注意事项：有些细胞比较特殊，如贴壁不牢，在运输过程中发生容易细胞脱落，这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入消化液1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂细胞培养箱中培养。

收到货后处理：

培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的 办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后

放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处

理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存( 40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售

后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的培养基,另外一瓶用自己配的培养基,以便进

行对比培养,换液拧松瓶盖),该细胞的STR鉴定可向客服咨询索取。

YS2231ChADSCs人脂肪间充质干细胞

YS2232CC28/I2人正常软骨细胞

YS2233CTPC1人甲状腺癌细胞

YS2234CHT-ori3人正常甲状腺细胞

YS2235CHUVSMC人脐静脉平滑肌细胞

YS2236CMPC5小鼠肾足细胞

YS2237CPL45人胰腺导管癌细胞

YS2238CFL83B小鼠正常肝细胞

YS2239CSUM149PT人乳腺癌细胞

YS2240CKBM7人慢性髓白血病细胞细胞

YS2241CMH-S小鼠肺泡巨噬细胞

YS2242CMDA-MB-157人乳腺癌细胞

YS2243CMDA-MB-435人乳腺癌细胞

YS2244CBT-483人乳腺导管癌细胞

YS2245CEVSA-T人乳腺癌细胞

YS2246CMCF-12A人乳腺癌细胞

YS2247CHCC-1395人乳腺癌细胞

YS2248CWiDr人结直肠癌细胞

YS2249CML-2人急性髓单核细胞白血病细胞

YS2250C697人前B细胞白血病细胞

YS2251CRS4;11急性B淋巴细胞白血病细胞

YS2252C95C人肺巨细胞癌细胞(低转移)

YS2253CMahlavu人肝癌细胞

YS2254CSK-N-AS人神经母细胞瘤细胞

YS2255CJG小鼠肾小球旁细胞

YS2256CNRK-49F大鼠肾正常成纤维细胞

YS2257CPan02人胰腺癌细胞

YS2258CJKT-1人精原瘤细胞

YS2259COV2008人卵巢癌细胞

YS2260CMMVECs小鼠心肌微血管内皮细胞

YS2261CLA795小鼠肺腺癌细胞

YS2262Ckasumi-1人急性髓系白血病细胞

YS2263COCI-LY10弥漫大B细胞淋巴瘤细胞

YS2264CHSAS3人皮肤成纤维细胞

YS2265CNCCIT人畸胎瘤细胞

YS2266CNEC8人畸胎瘤细胞

YS2267CNTera-2人卵巢畸胎瘤细胞

YS2268CCPA47牛肺血管内皮细胞

YS2269CCPAE牛肺血管内皮细胞

YS2270CHPDLF人牙周膜成纤维细胞

YS2271CWalker256大鼠肝癌细胞

YS2272CRAOEC大鼠血管内皮细胞

YS2273CIOSE80人正常卵巢上皮细胞

YS2274CalphaTC1clone6鼠胰岛素瘤胰岛a细胞

YS2275CU373人神经胶质瘤细胞

YS2276CSU-DHL-1弥漫性组织淋巴瘤细胞

YS2277CKit225IL-2依赖的人淋巴T细胞

YS2278CRASMC大鼠主动脉平滑肌细胞

YS2279CHD11鸡巨噬细胞

YS2280CHConEpic人结膜上皮细胞

YS2281CBAEC牛主动脉内皮细胞

YS2282CEOMA小鼠血管内皮瘤细胞

YS2283CNHEK正常人表皮角质形成细胞

YS2284CHemECs人血管瘤内皮细胞

YS2285CHFF人皮肤成纤维细胞

YS2286CIOSE-29人卵巢上皮细胞

YS2287CHUSMC人子宫平滑肌细胞

YS2288CCTXTNA2大鼠星形胶质细胞

YS2289CAMC-HN-8人喉癌细胞

YS2290CDC2.4小鼠骨髓来源树突状细胞

YS2291CL-6TG大鼠肌母细胞

YS2292CNCI-H209人小细胞肺癌细胞

YS2293CRMC-1鼠视网膜Muller细胞

YS2294CHLEC人淋巴内皮细胞

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