细胞名称：BIC-1人食管腺癌细胞ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

收到货后处理：

培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的 办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后

放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处

理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存( 40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售

后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的培养基,另外一瓶用自己配的培养基,以便进

行对比培养,换液拧松瓶盖),该细胞的STR鉴定可向客服咨询索取。

培养步骤

a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的培养液收集至离心管中,留5ml培养基,放入37℃、5%CO2孵

箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,

1)对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%ydbm消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞

消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液

,补加1-2mL培养基重悬。

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的培养基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的细

胞培养箱中培养。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例

分到新的含8ml培养基的新瓶中。

方法二:可选择半换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基新瓶

中。

b、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml培养液终止消化,再轻

轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上

再转入液氮罐中。C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

注意事项：有些细胞比较特殊，如贴壁不牢，在运输过程中发生容易细胞脱落，这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入消化液1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂细胞培养箱中培养。

售后条款:

1.）细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;

2. 细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;

3. 常温发货的细胞静置24小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封,出现污染,重发;

5. 活率问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,核实后予重发;

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,3天未告知的,视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

2）.细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?

1. 客户造成细胞污染,不重发;

2. 客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;

4. 细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;

5. 细胞培养时经其它处理的,不重发;

6. 细胞收到2天内,未告知,不重发;

7. 视具体情况而定。

YS2027CRPMI-7951人黑色素瘤细胞

YS2028CJHH-7人肝癌细胞

YS2029CEMT-6小鼠乳腺癌细胞

YS2030CHDMEC人皮肤微血管内皮细胞

YS2031CHCO人颅骨成骨细胞

YS2032CBIC-1人食管腺癌细胞

YS2033CHPF人肺成纤维细胞

YS2034CNKL人NK细胞

YS2035CM2-10B4小鼠骨髓纤维原细胞

YS2036CL428人霍奇金淋巴瘤细胞

YS2037ChTERT-HPNE人胰腺导管上皮细胞

YS2038CHDLM-2人霍奇金淋巴瘤细胞

YS2039CAHH-1人外周血额B淋巴细胞

YS2040CLTEP-sm人小细胞肺癌细胞

YS2041CRPMI1788人外周血B淋巴细胞

YS2042CNCI-H727人肺支气管肿瘤细胞

YS2043CKMY1022EB病毒转化的人B淋巴细胞

YS2044ChEM15A人子宫异位内膜上皮细胞细胞

YS2045COSKM-1小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)

YS2046CKFB人肾成纤维细胞

YS2047CB104大鼠神经母细胞瘤细胞

YS2048CATDC5小鼠成软骨细胞

YS2049CHCE-2[50.B1]人角膜上皮细胞

YS2050COSK-1小鼠诱导型多能干细胞(iPS细胞)

YS2051CRASMCs大鼠气道平滑肌细胞

YS2052CCOLO-1人角质形成细胞

YS2053CBSC40非洲绿猴肾细胞

YS2054CHepG2.2.15稳转HBV病毒HepG2细胞

YS2055CGC9811-P人胃癌腹膜高转移细胞

YS2056CrRMECs大鼠视网膜微血管内皮细胞

YS2057CL-540Hodgkin人霍奇金淋巴瘤细胞

YS2058CC8166人T淋巴细胞白血病细胞

YS2059CK7M2-WT小鼠骨肉瘤成骨细胞

YS2060CST2小鼠骨髓基质细胞

YS2061CHCCLM6人肝癌细胞

YS2062CQGY7703人肝癌细胞

YS2063CLICCF人肝内胆管癌细胞

YS2064CSW1783人脑星形胶质瘤细胞

YS2065CLIPF178C人胆管癌细胞

YS2066CLIPF155C人胆管癌细胞

YS2067CH4IIEC3大鼠肝癌细胞

YS2068CRBSMC大鼠脑动脉平滑肌细胞

YS2069Cmelan-a鼠黑色素瘤细胞

YS2070CKYSE180人食管癌细胞

YS2071CHIBEC人肝内胆管上皮细胞

YS2072CBAr-T人食管上皮细胞

YS2073ChESC人子宫内膜间质细胞

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