细胞名称：ZYM-DIEC02猪小肠上皮细胞ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

收到货后处理：

培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的 办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后

放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处

理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存( 40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售

后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的培养基,另外一瓶用自己配的培养基,以便进

行对比培养,换液拧松瓶盖),该细胞的STR鉴定可向客服咨询索取。

培养步骤

a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的培养液收集至离心管中,留5ml培养基,放入37℃、5%CO2孵

箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,

1)对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%ydbm消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞

消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液

,补加1-2mL培养基重悬。

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的培养基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的细

胞培养箱中培养。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例

分到新的含8ml培养基的新瓶中。

方法二:可选择半换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml培养基新瓶

中。

b、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml培养液终止消化,再轻

轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上

再转入液氮罐中。C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后

用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜培养

基继续培养。

注意事项：有些细胞比较特殊，如贴壁不牢，在运输过程中发生容易细胞脱落，这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入消化液1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂细胞培养箱中培养。

售后条款:

1.）细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;

2. 细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;

3. 常温发货的细胞静置24小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封,出现污染,重发;

5. 活率问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,核实后予重发;

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,3天未告知的,视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

2）.细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?

1. 客户造成细胞污染,不重发;

2. 客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;

4. 细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;

5. 细胞培养时经其它处理的,不重发;

6. 细胞收到2天内,未告知,不重发;

7. 视具体情况而定。

YS1722CMLE-12小鼠肺上皮细胞

YS1723C 9L小鼠胶质瘤细胞

YS1724C Toledo人B淋巴细胞株瘤

YS1725C BJAB人B细胞淋巴瘤细胞

YS1726C RCHACVRCHACV细胞系

YS1727C MUTZ-1细胞系

YS1728C HPBALLT细胞白血病细胞

YS1729C JMSU1JMSU1细细胞系

YS1730C TALL-1细胞系

YS1731C SKM-1人骨髓增生异常综合征细胞株

YS1732C KMS28BMKMS28BM细胞

YS1733C KMS34KMS34细胞

YS1734C KMS26人多发性骨髓瘤细胞

YS1735C KMS11人多发性骨髓瘤细胞

YS1736C RGM-1正常胃粘膜上皮细胞

YS1737C LNCaPcloneFGC人前列腺细胞

YS1738C CF-1小鼠胚胎成纤维细胞

YS1739C VX2兔肝鳞癌肿瘤细胞

YS1740C BMSC人骨髓间充质干细胞

YS1741C G422小鼠脑神经胶质母细胞

YS1742C ZYM-DIEC02猪小肠上皮细胞

YS1743C KOBKOB细胞系

YS1744C CAL-148人乳腺癌细胞

YS1745C CAL-51人乳腺癌细胞

YS1746C THLE-3SV40转化人肝上皮细胞

YS1747C THLE-2SV40转化人肝上皮细胞

YS1748C SCC-25人舌鳞癌细胞

YS1749C SCC-4人舌鳞癌细胞

YS1750C SCC-9人舌鳞癌细胞

YS1751C SCC-090人口腔鳞癌细胞

YS1752C RBE4大鼠脑血管内皮细胞

YS1754C SCC-15人舌磷癌细胞

YS1755C DOK人口腔黏膜癌前病变细胞

YS1756C C4-2B人前列腺癌细胞

YS1757C C4-2人前列腺癌细胞

YS1758C OCI-AML3人急性髓细胞性白血病细胞

YS1759C KG-1a人急性骨髓白血病细胞

YS1760C HTR8-SVneo人绒毛膜滋养层细胞

YS1761C RT4-D6P2T大鼠神经雪旺氏细胞

YS1762C IPI-2I猪回肠上皮细胞

YS1763C OP9-DL1小鼠骨髓基质细胞

YS1764C ARPE-19人视网膜上皮细胞

YS1765C hTERT-RPE1人视网膜色素上皮细胞

YS1766C PIG3原代人皮肤黑色素细胞

YS1767C PIG1原代正常人皮肤黑色素细胞

YS1768C SNK6人NK/T细胞淋巴瘤细胞

YS1769C EHEB慢性B细胞白血病

YS1770C 小鼠心肌成纤维细胞

YS1771C MES-SA人子宫肉瘤细胞

YS1772C HEEC人正常食管上皮细胞

YS1773C PA-TU-8988S人胰腺癌细胞

YS1774C RLE-6TN大鼠肺上皮Ⅱ型细胞

YS1775C HN13人口腔鳞状细胞癌

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