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供货周期 | 一周 | 规格 | T25瓶/2冷冻管 |
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货号 | YS708C | 主要用途 | 科研实验 |
细胞名称:LuNBL-7貂肺上皮细胞ATCC
细胞代次:P4
细胞规格:T25瓶(包邮)/2冷冻管(需加干冰运输费)
细胞冻存:无血清冻存液
细胞传代:第一次建议1:2
细胞收到后处理
培养至良好状态后灌满培养液并封好瓶口是运输细胞的最好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(最好40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。(注意密封培养瓶放入培养箱时要将盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶的培养基,另外一瓶用自己配的培养基,以便进行对比培养)
到货处理
用75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部,观察细胞生长情况。
1.不要打开培养瓶盖,将细胞放入 37℃培养箱中静置 3-4 小时后再做处理,以稳定细胞状态。
2.通过离心的方式收集细胞,然后将细胞沉淀加入5-8ml的培养基轻轻吹打均匀后移入新的T25培养瓶中培养。
培养时的注意技巧
1.换液前将培养瓶竖在培养箱静置1小时左右,轻轻吸掉3ml左右培养基,然后加入3ml的新鲜培养基,混匀后放入培养箱中培养。
2.如果细胞密度比较稀,培养基没有明显变化,可以加入500ul的FBS混匀后,竖着培养。
3.传代时,先按照换液步骤处理,吸掉3ml左右培养基后,加入10ml的新鲜培养基,混匀后分2个T25培养瓶培养。
4.培养一周左右可以离心一次,以去除一些死细胞。
5.该细胞比较脆弱,培养过程中不要频繁拿出来观察,以免影响细胞的生长。
6.该细胞的生长环境比较敏感,需使用较好的血清培养。
7.建议使用未TC处理的瓶或者皿培养.
注意事项:有些细胞比较特殊,如贴壁不牢,在运输过程中发生容易细胞脱落,这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000rpm离心5min,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入消化液1-2ml,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5ml培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。
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