细胞名称：MC3T3-E1Subclone24小鼠胚胎成骨细胞ATCC

细胞代次：P4

细胞规格：T25瓶（包邮）/2冷冻管（需加干冰运输费）

细胞冻存：无血清冻存液

细胞传代：第一次建议1:2

培养前的工作准备充分

包括耗材的处理、试剂的配置，无菌检验等等。

玻璃器皿的清洗。对于玻璃器皿（细胞瓶、装营养液的瓶子、小青m素瓶等）要先用洗衣粉刷干净（注意死角），然后冲干净。用酸液浸泡 24 h 以上，之后用清水冲洗 10 遍，除去残留酸液。瓶子之类，冲洗过程要使劲摇晃。然后在双蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎，160℃ 干烤 2 h 待用。

试剂配置。细胞培养用的液体一般使用双蒸以上的水即可。并注意 pH 值的调节。

无菌检验。主要采用过滤除菌：如抗生素、G-418 溶液、各类培养基、丙酮酸钠等。有些可以采用高压灭菌，如 PBS、D-Hank's等。

试剂分装保存包括营养液、血清等。

血清特别重要。血清必须贮存于 –20℃，如果一次无法用完一瓶，可将 40～50ml 分装于无菌酸处理瓶中，甚至置青m素瓶保存。一般厂商提供的血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。（一般情况下不影响细胞培养）

瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃ 冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。

注意事项：有些细胞比较特殊，如贴壁不牢，在运输过程中发生容易细胞脱落，这是正常现象。请将培养瓶所有培养液收集至离心管，1000rpm离心5min，收集上清作过渡培养（后期对比培养），沉淀加入消化液1-2ml，轻轻吹打，重悬，消化1-2分钟后，加5ml培养基终止反应。再离心，弃上清，加1-2ml培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代（两个T25），补充新的培养基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO₂细胞培养箱中培养。

售后服务告知书

1）细胞出现问题，可重发的情况有哪些？判定标准是什么？

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题，细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等，重发；

2. 细胞污染问题，请在收到产品48小时内，给我们提出真实的实验结果，核实后重发；

3. 常温发货的细胞静置24小时后，干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后，绝大多数细胞未存活，（需提供真实清晰的细胞状态照片），重发；

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封，出现污染，重发；

5. 细胞活性问题，请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，核实后予重发；

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照，3天未告知的，视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的，并跟技术人员沟通的，由技术人员判定为我方责任的，重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

二）细胞出现问题，不予以重发的情况有哪些？

1. 客户造成细胞污染，不重发；

2. 客户不正确操作致细胞状态不好，不重发；

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好，不重发；

4. 细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片的，不重发；

5. 细胞培养时经其它处理的，不重发；

6. 细胞收到2天内，未告知，不重发；

7. 视具体情况而定。

YS642CTca-8113人舌鳞癌细胞

YS643CTF-1人血液白血病细胞

YS644C白血病THP-1人单核细胞

YS645CTM3小鼠睾丸间质细胞

YS646CU-2OS[U2OS]人骨肉瘤细胞

YS647CU251人胶质瘤细胞

YS648CU-937淋巴瘤细胞人组织细胞

YS649CV79仓鼠肺细胞

YS650CVero非洲绿猴肾细胞

YS651CWI-38人胚肺细胞

YS652CY1[Y-1]小鼠肾上腺皮质瘤细胞

YS653C801-D[PLA-801D]性肺癌细胞人巨细胞

YS654CMC3T3-E1Subclone24前体细胞小鼠胚胎成骨细胞

YS655CA875[A-875]人黑色素瘤细胞

YS656CL6565小鼠白血病克隆细胞

YS657CCAL27人舌鳞癌细胞

YS658CCW-2人结肠腺癌细胞

YS659CEJ-1人膀胱癌细胞

YS660C（高分化）HCC94[HCC941122]人子宫鳞癌细胞

YS661CNCI-H460[H460]肺癌细胞人大细胞

YS662CM-NFS-60[NFS-60]/小鼠白血病G-CSF依赖性细胞小鼠髓性白血病淋巴细胞

YS663CA7r5大鼠胸大动脉平滑肌细胞

YS664CB16-F10小鼠皮肤黑色素瘤细胞

YS665CBeta-TC-6小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞

YS667CCalu-6人退行性癌细胞

YS668CCEM/C1白血病细胞人急性淋巴细胞

YS669CChangliver人张氏肝细胞

YS670CFO小鼠骨髓瘤细胞

YS671ChFOB1.19人SV40转染成骨细胞

YS673CJ774A.1小鼠单核巨噬细胞

YS674CK7M2wt[K7M2-WT]小鼠骨肉瘤成骨细胞

YS675CKATOIII[KATO3]人胃癌细胞

YS676CLWnt-3A小鼠皮下结缔组织细胞

YS677C亚克隆14MC3T3-E1Subclone14小鼠颅顶前骨细胞

YS678CMDA-MB-415人乳腺癌细胞

YS679CMDA-MB-436人乳腺癌细胞

YS680CNCI-H226[H226]人肺鳞癌细胞

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