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猪甘露糖受体C1样蛋白1(MRC1) ELISA 试剂盒
本试剂盒基于检测样本的特异性抗体包被酶标板,加入待测样本,样本与包被在酶标板上的特异性抗体结合,形成免疫复合物。清洗后加入酶标二抗,与免疫复合物结合,形成完整的三明治复合物。再加入底物溶液,底物在酶的作用下变色,颜色的深浅与样本的浓度呈正相关。后加入终止液,使反应停止,在450nm波长下测量各孔的光密度值(OD值),通过标准曲线计算样本的浓度。
猪甘露糖受体C1样蛋白1(MRC1) ELISA 试剂盒
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂盒组成
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1个 | 1个 | |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
标准品:36U/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
实验步骤
1. 准备试剂盒:将试剂盒从冰箱中取出,室温放置30分钟以上,使试剂盒恢复至室温。
2. 加样:分别向各孔中加入标准品、待测样本和空白孔,每孔加入50μl。
3. 孵育:用封板胶纸封住反应孔,轻轻振荡混匀,37℃孵育1小时。
4. 洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液充分洗涤4-5次,每次30秒。
5. 加酶标二抗:每孔加入50μl酶标二抗溶液,轻轻振荡混匀,37℃孵育30分钟。
6. 洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液充分洗涤4-5次,每次30秒。
7. 加底物:每孔加入50μl底物溶液,轻轻振荡混匀,37℃孵育15-20分钟。
8. 终止反应:每孔加入50μl终止液,轻轻振荡混匀。
9. 读数:用酶标仪在450nm波长处读取各孔的光密度值。
注意事项
在进行ELISA检测时,需要注意以下几点:
1. 保证试剂盒的质量:选择质量可靠、经过认证的试剂盒,避免使用过期或质量不稳定的试剂。
2. 标准化操作:按照试剂盒说明书进行标准化操作,避免操作过程中的人为误差。
3. 避免交叉污染:在实验过程中,要特别注意防止样品和试剂之间的交叉污染,以免影响检测结果的准确性。
4. 温度控制:ELISA检测需要在恒温条件下进行,因此要确保实验过程中温度的稳定和准确性。
5. 空白吸光度值:在实验过程中,要特别注意空白吸光度值的稳定性,避免其对检测结果的影响。
6. 实验数据的处理:对实验数据进行正确的处理和分析,包括对异常值的处理、数据转换等,以确保结果的准确性和可靠性。
7. 质量控制:在实验过程中,应进行必要的质量控制,如定期进行室内质控和室间质评等,以确保实验室检测结果的准确性。
试剂盒性能:
1. 检测范围:1.95 nmol/L –100 nmol/L。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.78 nmol/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
ELISA90分钟一步法的优点
ELISA90分钟一步法的优点主要包括:
1.操作简单:该方法只需要一步操作即可完成,操作过程简单明了,易于掌握。
2.快速:ELISA90分钟一步法可以在短时间内完成,适合于大批量样品的快速检测。
3.特异性高:该方法采用特定的抗体或抗原进行固定和检测,因此具有较高的特异性。
4.灵敏度高:ELISA90分钟一步法具有较高的灵敏度,可以检测出较低浓度的抗原或抗体。
5.重复性好:该方法的重复性较好,结果较为稳定。
6.安全性高:ELISA90分钟一步法不使用放射性同位素等有害物质,因此具有较高的安全性。
需要注意的是,ELISA90分钟一步法也存在一些缺点,例如可能会受到非特异性干扰因素的影响,导致结果不准确。此外,该方法的试剂成本较高,不适合于小规模样品的检测。
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