人白介素28A(IL-28A) ELISA 试剂盒     

原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。

3. 细胞上清液：3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。

5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解 冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作步骤

1. 样品采集与处理

（1）血清：收集血液后，室温放置30分钟左右，待血液凝固后离心分离血清。

（2）血浆：收集血液后，加入适量抗凝剂（如EDTA），离心分离血浆。

（3）细胞培养上清液：收集细胞培养液，离心去除细胞残骸，收集上清液。

2. 样品稀释

根据需要，将血清、血浆或细胞培养上清液进行适当稀释。

3. 加样与温育

（1）将稀释后的样品加入酶标板孔中，每孔加入100μL。

（2）加入适量酶标二抗，每孔加入100μL。

（3）将酶标板放入37℃恒温箱中温育30分钟。

4. 洗板与显色

（1）取出酶标板，用洗涤液洗3次，每次5分钟。

（2）加入底物液，每孔加入100μL，放入37℃恒温箱中温育15分钟。

（3）加入终止液，每孔加入50μL，混匀。

5. 测定与结果计算

（1）用酶标仪检测各孔的光密度值（OD值），波长为450nm。

（2）根据标准品浓度与OD值的对应关系，计算出样品浓度。

试剂盒组成

结果计算

绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。

人白介素28A(IL-28A) ELISA 试剂盒   

免责声明

试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或生物体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担， 本公司概不负责。

严格按照说明书操作，不同批号不可交换使用，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。

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