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ELISPOT（Enzyme-linked Immunospot Assay）全名为酶联免疫斑点检测，结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术，能够检测到单个细胞分泌的细胞因子情况。
ELISPOT 实验使用 PVDF 膜为底的 96 孔板，包被上特异性的单克隆抗体来捕获细胞分泌的细胞因子。在培养板的孔内加入待检测的细胞和抗原刺激物进行培养，在刺激物的刺激下，T细胞就会在对应的时间段分泌对应的细胞因子。细胞因子被包被在膜上的抗体所捕获。洗去细胞，被捕获的细胞因子可以与生物素标记的第二抗体结合，然后用酶标亲和素与生物素结合，进行化学酶联显色，就可以在膜的局部形成一个个圆形的斑点，每一个斑点就对应了当初一个分泌细胞因子的细胞。统计膜上的斑点的数目，再除以当初加入孔内的细胞总数，就可以计算出阳性细胞的百分比。