自动化样品破碎

TissueLyser II自动化样品破碎通过不锈钢珠、碳化钨珠或玻璃珠在塑料样品管中的高速震动，可同步破碎多个生物样本。借助适当的适配器，可同时处理48或192个样本。也可使用研磨罐处理大体积样本。同时提供各种研磨珠、研磨珠分配器、收集管及管盖。

TissueLyser II自动化样品破碎

用于中到高通量样本破碎，适用于分子分析

• 破碎过程便利、安全
• 适配器专为高通量破碎而优化
• 提供多种配件
• 确保难裂解组织获得高重复性结果
• QIAGEN样本处理体系的重要组成部分

通过不锈钢珠、碳化钨珠或玻璃珠在塑料样品管中的高速震动，TissueLyser II可同步破碎多个生物样本。借助适当的适配器，可同时处理48或192个样本。也可使用研磨罐处理大体积样本。同时提供各种研磨珠、研磨珠分配器、收集管及管盖。TissueLyser II包括适配器在内的所有配件与TissueLyser（已停产）兼容。

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可靠检测miRNA。

将大鼠肾脏置于RNAlater RNA Stabilization Reagent中稳定，使用TissueLyser II，在QIAzol Lysis Reagent中25 Hz破碎25 mg样本2 x 5分钟。使用miRNeasy Mini Kit，采用手动步骤 (Manual) 或在QIAcube全自动核酸纯化仪 (QIAcube) 上进行自动化处理，纯化包含miRNA的总RNA。使用miScript System进行Real-time RT-PCR，检测2种不同的miRNA——miR-16和miR-25。

高效破碎动物组织。

冷冻 (Frozen) 组织 (20 mg) 或将其置于RNAlater RNA Stabilization Reagent (RNAlater) 中稳定，然后使用TissueLyser II破碎 (肝脏和肌肉破碎2 x 2分钟；皮肤破碎2 x 5分钟)。使用RNeasy Mini Kit (肝脏)、RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit (皮肤) 或RNeasy Lipid Tissue Mini Kit (肌肉) 纯化RNA。[A] 采用1.2 %的甲醛琼脂糖凝胶分析显示了清晰的核糖体RNA条带，表示具有完整的RNA。[B] 利用A₂₆₀ nm吸光度测量，定量RNA产量。

 

 

从植物组织中纯化RNA具有可重复性。

使用TissueLyser II破碎冷冻的植物叶子 (2 x 1分钟)。使用RNeasy Plant Mini Kit纯化RNA，并在1.2 %的甲醛琼脂糖凝胶上进行分析。核糖体RNA条带清晰均匀，表示可重复纯化出完整的RNA。T：番茄 (100 mg)；A：拟南芥 (25 mg)；C：棉花 (100 mg)；M：玉米 (100 mg)；R：油菜 (100 mg)。

 

 

从动物组织中纯化DNA，具有可重复性。

将一只大鼠的心脏切成96 x 25 mg的小块，然后使用TissueLyser II破碎 (2 x 15秒)。在QIAcube全自动核酸纯化仪上使用DNeasy Blood & Tissue Kit (采用Reagent DXzui大程度减少裂解起泡现象) 进行自动DNA纯化。48个样本的琼脂糖凝胶分析显示了各样本中的DNA量*。M：分子量标准。

 

 

从动物组织中纯化完整的蛋白。

将组织样本(50 mg) 置于Mammalian Cell Lysis Buffer中预冷至4°C，使用TissueLyser II 20 Hz破碎3 x 90秒。使用针对∝-tubulin、β-actin和GAPDH的抗体对裂解物 (15 μg) 进行western印迹分析。同时分析纯化的蛋白质 (1 μg、100 ng和10 ng)，作为阳性对照。Lu：肺；He：心脏；Sp：脾；Li；肝；Ki：肾；Br：脑；Th：胸腺。

 

 

从革兰氏阳性菌中纯化RNA，具有可重复性。

使用RNAprotect Bacteria Reagent稳定B. subtilis培养物。使用TissueLyser II，在裂解缓冲液中30 Hz破碎单个样本 (各2.5 x 10⁸个细胞) 5分钟。使用RNeasy Protect Bacteria Mini Kit纯化总RNA，并在甲醛琼脂糖凝胶上进行分析。

 

 

TissueLyser II.

 

 

Performance

TissueLyser II尤其适合高通量的样本破碎，适用于人类、动物和植物组织、细菌和酵母。可纯化获得高品质的DNA、RNA、miRNA和蛋白质，甚至对于难裂解的组织也具有高度的可重复性（参见"Efficient disruption of animal tissues"、"Reproducible RNA purification from plant tissues"、"Reproducible DNA purification from animal tissue"、"Purification of intact protein from animal tissue"、"Reproducible RNA purification from Gram-positive bacteria"和"Reliable detection of miRNAs"）。

 

 

Principle

基因分型、基因表达分析和蛋白质组学研究均要求对生物样本进行高效破碎，以确保获得高产的DNA、RNA和蛋白质。TissueLyser II体系通过研磨珠的高速震荡来实现对样本的有效破碎。TissueLyser II可快速、*的破碎样本，*释放生物分子，并可同时对样本进行匀，协助后续使用的QIAGEN试剂盒进行纯化（参见"QIAGEN purification kits compatible with QIAGEN disruption systems"）。

QIAGEN提供从样本收集到DNA、RNA和蛋白质纯化的完整解决方案，TissueLyser II是其中关键的组成部分。TissueLyser II可作为QIAsymphony SP等QIAGEN自动化仪器高通量制备和分析样本的补充（参见"QIAGEN high-throughput automation"）。这一即用型仪器可从1–96个样本中自动纯化DNA、RNA和蛋白质。TissueLyser II也适用于QIAGEN手动样本制备试剂盒（参见"QIAGEN purification kits compatible with QIAGEN disruption systems"）。

进行RNA研究时，新鲜收集的组织可在RNAlater RNA Stabilization Reagent中稳定，可有效避免操作过程中RNA的降解。对于需要纯化DNA、 RNA和蛋白质的应用，可使用Allprotect Tissue Reagent，将新鲜收集的组织中的待分析物迅速稳定。

QIAGEN高通量自动化仪器 >

仪器	目的	通量
QIAsymphony SP核酸提取纯化分析仪	纯化DNA、RNA和蛋白质	每批1–96个样本
BioRobot Universal System	纯化DNA和RNA	96孔板
QIAxcel	对DNA片段和RNA进行电泳分析	每批多达96个样本
QIAgility	反应体系构建	每批多达384个样本
Rotor-Gene Q实时荧光定量PCR分析仪	real-time PCR和HRM分析	每批多达100个样本
PyroMark Q96 MD or ID	甲基化和突变分析	每批多达96个样本

与QIAGEN破碎仪器兼容的QIAGEN纯化试剂盒

纯化的被分析物	样本类型	QIAGEN试剂盒
RNA	容易裂解的组织	RNeasy Kits
		RNeasy Plus Kits
		RNeasy Protect Kits
RNA	富含纤维的组织	RNeasy Fibrous Tissue Kits
RNA	各种类型组织	RNeasy Lipid Tissue Kits
		RNeasy Universal Tissue Kits
RNA	植物组织	RNeasy Plant Mini Kit
RNA	酵母	RNeasy Kits
RNA	细菌	RNeasy Protect Bacteria Kits
microRNA	各种类型组织	miRNeasy Kits
DNA	人类组织	QIAamp DNA Kits
DNA	动物组织	DNeasy Blood & Tissue Kits
蛋白质	组织	Qproteome Mammalian Protein Prep Kit
磷蛋白	组织	PhosphoProtein Purification Kit
糖蛋白	组织	Qproteome Glycoprotein Kits
DNA和RNA	组织	AllPrep DNA/RNA Kits
DNA、RNA和蛋白质	组织	AllPrep DNA/RNA/Protein Mini Kit

 

 

Procedure

TissueLyser Adapter Sets使用微型收集管，可处理多达2 x 96个样本，或使用2 ml微型离心管，处理多达2 x 24个样本。如果在样本破碎过程中不使用裂解缓冲液，则需要将适配器置于–80°C环境中预冷。在破碎时样品管需保持密封，以避免交叉污染，这对于real-time RT-PCR或芯片分析等高敏感性的下游应用尤其重要。根据样本类型不同，破碎使用不锈钢珠、碳化钨珠或玻璃珠进行。TissueLyser Bead Dispensers用来方便的将单个珠子加入到离心管中，或同时将96个研磨珠加入到收集管中。TissueLyser II也可配合Grinding Jar Sets使用，破碎大体积样本。

 

 

Applications

TissueLyser II自动化样品破碎每批可处理多达192个样本，因此是遗传学、转录组学和蛋白质组学研究中获得生物信息的理想解决方案。TissueLyser II是新一代高通量测序的shou选破碎仪器。TissueLyser II可与多种QIAGEN样本纯化试剂盒配套使用，样本纯化可以手动进行，也可以在QIAcube全自动核酸纯化仪、QIAsymphony SP核酸提取纯化分析仪、EZ1 Advanced、BioRobot或BioSprint工作站上自动进行。