本视频为厦门逸漠生物出品关于T25瓶细胞迁移步骤操作指南，我们对每一步操作都做了演示，以便实验者更好地理解常温运输细胞转移实验过程。

细胞收货处理(T25瓶)

实验准备

提前开启紫外照射30min消毒灭菌，工作台开灯通风10min，用75%酒精擦拭台面

所需试剂物品

专用培养基、胰酶、PBS

到货处理

1.在细胞间拆封包裹，阅读细胞说明书和检测报告

2.取出T25瓶，检查是否在运输过程中破损，在显微镜下镜检并拍照存档

3.放入培养箱稳定细胞状态，约2-4小时

4.2-4小时后拿出T25细胞瓶，显微镜下观察细胞状态，细胞状态稳定密度85%以上，即进行细胞转移步骤

细胞迁移步骤

第一步：吸出运输用培养基，加入5m」1xPBS清洗1遍，去掉PBS，加入2m1胰酶消化，并放入培养箱孵育1-2min

第二步：在显微镜下观察细胞是否脱落，加入3mI培养基终止消化，轻轻吹打细胞，使其脱离瓶壁

第三步：细胞悬液转移到15ml离心管中，1000rpm离心5min

第四步：拿出一个新的10cm培养皿，加入8-10ml培养基，在皿上标记细胞名称，培养基名称，日期

第五步：离心结束后，用75%的酒精喷管身后，放回工作台中，去上清，加入1m]培养基，重悬后加到10cm培养皿中，放入37℃培养箱培养

注意事项

1.收到细胞后，首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系

2.静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照)，记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据)；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态

3.由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决

4.仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致