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小鼠LKB1(LKB1)elisa试剂盒

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ELISA法是免疫诊断中的一项新技术，现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定，根据已经使用的结果，认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查，而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此，也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗ti，而且也可用于测定体液中的循环抗原，所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大，

组成结构

1、血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内du素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、2、血浆：EDTA、柠檬suan盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。

5、保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

小鼠LKB1(LKB1)elisa试剂盒

试剂盒小贴士

1. 在收到试剂盒后，为保证检测效果，需要根据说明书中保存条件正确储存。除非特别注明，试剂盒大多是在2～8°C条件下储存

2. 在实验进行前，请确认包装中的试剂盒成分与说明书一致，再进行后续操作

3. 溶解标准品过程中，注意标准品是否受潮，过程中要避免产生泡沫

4. 为了避免交叉污染，配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽

5. 每次孵育时，正确使用封板胶纸可保证结果的准确性

6. 正确洗板有助于实验结果的稳定性

7. TMB显色底物在上板前应为无色，请避光保存。加入孔板后，将由无色变成不同程度的蓝色

8. 终止液上板顺序需与底物上板顺序一致，加入终止液，溶液颜色由蓝色变为黄色。如果出现绿色，即表明终止液与底物未混匀，请充分混合

实验详细操作程序

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；样本孔加待测样本50μL。

3.  样本孔先加待测样本10μL，再加样ben稀释ye40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

一般来讲，96T能检测90个样本，48T能检测42个样本，这里面需要用标样来做标准曲线，所以各位需要做实验的老师们，请在购买ELISA试剂盒的时候注意，需要做多少个样本，在决定买多大规格的试剂盒，以免做实验时出现试剂盒不够用或者浪费！

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